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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)

[求助] 高效液相出峰问题

求助高手,我用高效液相进了20微升玉米赤霉烯酮标准品乙腈溶液10ppm,用乙腈:甲醇:水(加了一点乙酸铵)=55:10:35,出了两个连着的峰,前一个峰高,后一个峰低,请问是怎么回事儿呀?急急急
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lw1237

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
改变流速试试看,要不再换下流动相组成

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
liuwei
8楼2013-07-24 12:12:05
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普通回帖

872184585

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是标准??就出峰分岔???????以从以下方法试一下:1.有没有???能是你本身柱??的问题?2.???以试一下??动相的梯度,或改???一下pH值试试。我现在也是这??问题,??过我??是标准??出峰,而是在测制剂中的???物时会这样,已??堵在这好几个月了,准备明天调一下??动相,推迟出峰时间看看。

[ ????????? http://muchong.com/3g ]
2楼2013-07-23 23:46:29
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般有些对照品都不是很纯,我们只是用它来定位,还有一种可能就是你的柱子是不是不太好使啊
所有的成就都源于新的挑战
3楼2013-07-24 10:29:23
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)

???????:
2?: Originally posted by 872184585 at 2013-07-23 23:46:29
你是标准??就出峰分岔???????以从以下方法试一下:1.有没有???能是你本身柱??的问题?2.???以试一下??动相的梯度,或改???一下pH值试试。我现在也是这 ...

?????????????????????????????????????????
4楼2013-07-24 10:35:58
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by suruiqin at 2013-07-24 10:29:23
一般有些对照品都不是很纯,我们只是用它来定位,还有一种可能就是你的柱子是不是不太好使啊

那怎么看是不是柱子本身的问题呢?会不会是流动相还需要优化呢?还有加乙酸铵的作用是什么呢?
5楼2013-07-24 10:48:08
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
焕然烟雨: 金币+4, 有帮助 2013-07-26 11:42:14
引用回帖:
5楼: Originally posted by 焕然烟雨 at 2013-07-24 10:48:08
那怎么看是不是柱子本身的问题呢?会不会是流动相还需要优化呢?还有加乙酸铵的作用是什么呢?...

乙酸胺一般是用来改善色谱峰形的吧,如果是那两个峰是样品中带的,那你就略调一下流动相中乙腈或甲醇的比例,让他们与主峰稍微分开些,使分离度达到要求即可
所有的成就都源于新的挑战
6楼2013-07-24 10:55:14
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焕然烟雨

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by suruiqin at 2013-07-24 10:55:14
乙酸胺一般是用来改善色谱峰形的吧,如果是那两个峰是样品中带的,那你就略调一下流动相中乙腈或甲醇的比例,让他们与主峰稍微分开些,使分离度达到要求即可...

我调了一下有机相和水相的比例,图片已经上传,请帮我分析一下,看是什么原因,谢谢啦!
高效液相出峰问题
ZON.jpg

7楼2013-07-24 11:29:53
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ying_cheng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
焕然烟雨: 金币+1, 有帮助 2013-07-26 11:42:32
1、进空白乙腈对比一下,看看是样品带进来的还是系统本身的
2、重新配标样,浓度大一点,看那两个峰是不是跟着都变大了。如果是柱子的原因,进样量保持不变的话,因系统原因出现的那个峰就不会变大,如果不是系统原因,那就继续优化流动相吧,或者换柱子试试
9楼2013-07-24 12:36:51
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suruiqin

版主 (知名作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 焕然烟雨 at 2013-07-24 11:29:53
我调了一下有机相和水相的比例,图片已经上传,请帮我分析一下,看是什么原因,谢谢啦!

ZON.jpg
...

可能是多个峰没分开,你一个一个的调,比如,先调低乙腈试试,别改甲醇比例
所有的成就都源于新的挑战
10楼2013-07-26 12:09:17
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