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tyslfzc

银虫 (初入文坛)

[求助] Ecoli 重组蛋白表达

想请教一下,用ecoli系统表达重组蛋白,两次expression的 cell 可以放在一起 进行后续纯化吗?就是lysis, 然后过各种affinity column/size exclusion column... 谢谢!
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-17 09:42:32
挑单克隆在鉴定克隆时是非常必要的,后面经验证正确的单克隆再次划线、活化时不一定挑单克隆。你现在是做纯化了,摇菌的时候都是从同一克隆划线活化出来的,所以没有太大关系。...

不是,问题就是expression 就是从不同的colony分别expression的,这才是问题。。。
8楼2013-07-19 08:15:34
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
tyslfzc(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩 2013-07-16 13:56:53
如果只是为了纯化蛋白,可以合并细胞样品。
2楼2013-07-16 11:38:26
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没问题啊   蛋白都是一样的
hold住
3楼2013-07-16 16:04:05
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tyslfzc

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-16 11:38:26
如果只是为了纯化蛋白,可以合并细胞样品。

可是两次cell里面自带的一些酶不会相互影响吗?我指至少在lysate之后?
我这么问是因为表达的时候,都要求pick single colony,因为有这些限制。
所以我才怀疑,后续有没有影响。
谢谢!
4楼2013-07-17 07:30:08
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