应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑
71/1返回列表
查看: 1642  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晶晶虫

金虫 (小有名气)

[求助] 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑

最近在研究DNA和蛋白质相互作用的ChIP技术，实验室内和周围实验室都没有人做过，有个问题：我看文章上基本上的实验步骤是用甲醛完成DNA和protein在动植物体内的交联，之后提取染色质，在超声破碎后用所要研究的蛋白质的特异性抗体做免疫沉淀，DNA-protein复合物提取出来之后再解交联，然后DNA拿去测序或者microarray.

看文献中的方法都是做的体内实验，有没有可能我直接提取植物DNA，然后加上我的自己在E,coli中表达纯化的重组蛋白体外交联，然后利用我重组蛋白上的His-tag的抗体直接免疫沉淀DNA和蛋白复合物，或者用NI柱纯化呢？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-10 01:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晶晶虫: 金币+5 2013-01-10 23:54:17
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-01-10 07:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晶晶虫: 金币+3 2013-01-10 23:54:24
如果你要试试的话，我建议你用无细胞翻译体系，而不是Ecoli.否则你的实验假象太大，发布了好文章。
赞一下(1人) 回复此楼
shine
3楼2013-01-10 10:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶虫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-10 07:10:40
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。

恩呵, 你知道有人这样做过么，有没有参考文献呢哇？
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-10 16:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
晶晶虫: 金币+2 2013-01-14 17:13:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晶晶虫 at 2013-01-10 16:55:35
恩呵, 你知道有人这样做过么，有没有参考文献呢哇？...

有人这么做的。不过都是结合一些特定的体内实验来补充验证interaction的。我自己不做这个，见到有些文献里有说到，没仔细研究过这个方法。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-01-11 08:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圈圈媛媛

铁虫 (初入文坛)
我也想近期做ChIP，但是之前实验室没人做过，所以特别不了解，请问染色质免疫共沉淀中沉淀的蛋白要再进行western检测么？还是说能够沉淀就证明有相关蛋白的存在？
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-22 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 圈圈媛媛 at 2013-03-22 21:42:45
我也想近期做ChIP，但是之前实验室没人做过，所以特别不了解，请问染色质免疫共沉淀中沉淀的蛋白要再进行western检测么？还是说能够沉淀就证明有相关蛋白的存在？

你好，请问下，你现在做chip如何了呢？
相信应该也有很多经验了吧，不知能否指导一下我这个小白呢？
赞一下 回复此楼
nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
7楼2019-09-26 12:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晶晶虫 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 18/900 2026-08-01 13:56 by gltch
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 8/400 2026-08-01 13:53 by y4XuShGyllvT
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 10/500 2026-08-01 13:51 by y4XuShGyllvT
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 10/500 2026-08-01 13:51 by y4XuShGyllvT
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 7/350 2026-08-01 13:49 by y4XuShGyllvT
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 10/500 2026-08-01 13:49 by y4XuShGyllvT
[基金申请] 小木虫看见有人已经知道结果了 +16 1234567wang 2026-07-25 20/1000 2026-08-01 08:57 by type2type
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +14 wangze12014 2026-07-28 18/900 2026-07-31 18:35 by lzchaihuo
[教师之家] 基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 8/400 2026-07-31 18:13 by beefly
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +11 winnerche 2026-07-29 15/750 2026-07-30 23:08 by jnhyjjm
[考博] 申请2027年材料/化学类博士 10+3 考研老狗? 2026-07-25 5/250 2026-07-30 19:33 by 白色木鱼
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 时间戳他又来了 +14 晓晓爱翠翠 2026-07-26 17/850 2026-07-29 16:30 by 呵呵二哥
[有机交流] 这个自发加氧反应的机理是什么？ 50+4 YUAN2273 2026-07-25 7/350 2026-07-29 12:27 by xiaobenpu
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了，我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[基金申请] 准备明年的基金了 +5 Tide man 2026-07-27 5/250 2026-07-28 09:25 by newfuzzy1
[分析] 水蒸气蒸馏法乳化现象 +3 月光娇娇 2026-07-26 3/150 2026-07-26 23:25 by caiyun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭