应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑
71/1返回列表
查看: 1369  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晶晶虫

金虫 (小有名气)

[求助] 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑

最近在研究DNA和蛋白质相互作用的ChIP技术，实验室内和周围实验室都没有人做过，有个问题：我看文章上基本上的实验步骤是用甲醛完成DNA和protein在动植物体内的交联，之后提取染色质，在超声破碎后用所要研究的蛋白质的特异性抗体做免疫沉淀，DNA-protein复合物提取出来之后再解交联，然后DNA拿去测序或者microarray.

看文献中的方法都是做的体内实验，有没有可能我直接提取植物DNA，然后加上我的自己在E,coli中表达纯化的重组蛋白体外交联，然后利用我重组蛋白上的His-tag的抗体直接免疫沉淀DNA和蛋白复合物，或者用NI柱纯化呢？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-10 01:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晶晶虫: 金币+5 2013-01-10 23:54:17
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-01-10 07:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
晶晶虫: 金币+3 2013-01-10 23:54:24
如果你要试试的话，我建议你用无细胞翻译体系，而不是Ecoli.否则你的实验假象太大，发布了好文章。
赞一下(1人) 回复此楼
shine
3楼2013-01-10 10:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶虫

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-10 07:10:40
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。

恩呵, 你知道有人这样做过么，有没有参考文献呢哇？
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-10 16:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
晶晶虫: 金币+2 2013-01-14 17:13:31
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晶晶虫 at 2013-01-10 16:55:35
恩呵, 你知道有人这样做过么，有没有参考文献呢哇？...

有人这么做的。不过都是结合一些特定的体内实验来补充验证interaction的。我自己不做这个，见到有些文献里有说到，没仔细研究过这个方法。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-01-11 08:36:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圈圈媛媛

铁虫 (初入文坛)
我也想近期做ChIP，但是之前实验室没人做过，所以特别不了解，请问染色质免疫共沉淀中沉淀的蛋白要再进行western检测么？还是说能够沉淀就证明有相关蛋白的存在？
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-22 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

prthefu

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 圈圈媛媛 at 2013-03-22 21:42:45
我也想近期做ChIP，但是之前实验室没人做过，所以特别不了解，请问染色质免疫共沉淀中沉淀的蛋白要再进行western检测么？还是说能够沉淀就证明有相关蛋白的存在？

你好，请问下，你现在做chip如何了呢？
相信应该也有很多经验了吧，不知能否指导一下我这个小白呢？
赞一下 回复此楼
nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
7楼2019-09-26 12:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晶晶虫 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 哈工大计算机刘劼团队招生 +4 hit_aiot 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:53 by 一声问好
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 求调剂 +8 yunziaaaaa 2026-03-01 9/450 2026-03-02 11:03 by 黑！在干嘛
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 材料学硕318求调剂 +7 February_Feb 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:57 by 无际的草原
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:38 by lature00
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 13/650 2026-03-02 07:27 by 好好好1233
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考博] 26申博 +4 想申博！ 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博！
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭