24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1426  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

晶晶虫

金虫 (小有名气)

[求助] 关于ChIP染色质免疫沉淀技术的疑惑

最近在研究DNA和蛋白质相互作用的ChIP技术,实验室内和周围实验室都没有人做过,有个问题:我看文章上基本上的实验步骤是用甲醛完成DNA和protein在动植物体内的交联,之后提取染色质,在超声破碎后用所要研究的蛋白质的特异性抗体做免疫沉淀,DNA-protein复合物提取出来之后再解交联,然后DNA拿去测序或者microarray.

看文献中的方法都是做的体内实验,有没有可能我直接提取植物DNA,然后加上我的自己在E,coli中表达纯化的重组蛋白体外交联,然后利用我重组蛋白上的His-tag的抗体直接免疫沉淀DNA和蛋白复合物,或者用NI柱纯化呢???
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

圈圈媛媛

铁虫 (初入文坛)

我也想近期做ChIP,但是之前实验室没人做过,所以特别不了解,请问染色质免疫共沉淀中沉淀的蛋白要再进行western检测么?还是说能够沉淀就证明有相关蛋白的存在?
6楼2013-03-22 21:42:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晶晶虫: 金币+5 2013-01-10 23:54:17
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。
2楼2013-01-10 07:10:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang881007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
晶晶虫: 金币+3 2013-01-10 23:54:24
如果你要试试的话,我建议你用无细胞翻译体系,而不是Ecoli.否则你的实验假象太大,发布了好文章。
shine
3楼2013-01-10 10:48:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晶晶虫

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-10 07:10:40
crosslinking可以做in vitro实验。不过体外实验的假象多。

恩呵, 你知道有人这样做过么,有没有参考文献呢哇?
4楼2013-01-10 16:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 327求调剂 +22 Xxjc1107. 2026-04-13 24/1200 2026-04-14 14:45 by zs92450
[考研] 08工学 309分求调剂 +11 Yin DY 2026-04-08 11/550 2026-04-14 12:55 by fqwang
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 290求调剂 +18 柯淮然 2026-04-12 20/1000 2026-04-13 12:56 by cyh—315
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 12/600 2026-04-13 08:50 by lhj2009
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 求调剂,262机械专硕 +8 嗯yyl 2026-04-08 8/400 2026-04-12 02:31 by 秋豆菜芽
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 284求调剂 +11 archer.. 2026-04-09 12/600 2026-04-11 20:23 by 蓝云思雨
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
信息提示
请填处理意见