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老伦敦把子肉

新虫 (初入文坛)

[求助] 3‘RACE结果不稳定 怎么办??

我想鉴定目的基因在组织中不同的splicing form,方法如下:选取人组织样本,液氮研磨提取RNA,Takara 3' RACE试剂盒进行RACE,Takara Hot start Taq扩增,目的基因全长4k多,我尝试多次但扩增不出来全长,2k以下到是有不同的片段,话说这种结果也挺好,按理说送去测序就行。可是我换用不用人的组织样本重复试验时,结果不一样。。。就是片段大小都不一样,我RNA提取的较为完整,基本没有降解,各位专家看看,给予指导啊!
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