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tangmincui

新虫 (小有名气)

[求助] 求助 细菌 10倍梯度稀释 平板该涂多少稀释液啊?

求助呀!我稀释到 10*-9,每个平板涂30ul,不知道能长不?
要是做梯度稀释,平板该涂多少?有规定吗?谢谢指点!
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:11:54
估计克隆数目不会多。不知道你的菌液OD是多少,一般的菌液的浓度是10的8次方数量级的。涂多少要看你的平板大小,我一般用10cm直径的板子是涂100μl。

我没测OD值,,因为我想获得单菌落,我想进行菌种鉴定,不知道这么做可以吗?谢谢你啊!
3楼2013-07-03 00:31:25
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:35:22
用稀释涂布的办法是可以得到单菌落的,一般用梯度稀释,一个平板上有几十到一百个菌落比较合适。...

梯度稀释,和稀释涂布,不一样吗?我是将菌液用无菌水稀释,然后涂的。新手新手,谢谢解答!
5楼2013-07-03 00:54:54
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tangmincui

新虫 (小有名气)

送红花一朵
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6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 01:54:54
一样的,不过我一般用LB稀释,感觉对菌好一点。...

谢啦!
9楼2013-07-03 09:01:02
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-07-03 09:00:20
菌种鉴定需要对活菌含量进行测定吗?

生理生化法鉴定的话貌似需要接菌培养,观察颜色、产气等现象;

分子生物学方法是通过提取DNA进行测序,将序列与NCBI中标准菌株进行对比看同源性

如果要获得单菌落,不 ...

正纠结呢?我现在有 有活性的菌,想鉴定是什么菌,不知道接下来该怎么做?我 涂平板 挑单菌落 就是一种菌吗?谢谢指点!
11楼2013-07-03 12:15:49
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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10楼: Originally posted by weiyasong at 2013-07-03 10:34:35
每个平板100微升,这是国家标准上说的额。
涂板计数要选择三个合适的稀释度,每个稀释度涂三个平板。你稀释到 10*-9,可以选择 10*-9, 10*-8, 10*-7,三个稀释度进行涂板

哦哦,我之前没查到,谢谢啊!
12楼2013-07-03 12:18:47
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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15楼: Originally posted by zhupeilei at 2013-07-03 19:43:36
一般都是涂0.1ml的,他们说的都很对。不过我觉得没那么严格,你可以试试效果怎么样,如果好的话算好稀释倍数就可以了

恩,好的,我试试,谢谢你!
16楼2013-07-04 13:15:50
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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18楼: Originally posted by puresnowlqin at 2013-09-06 11:15:56
获得单菌落用于菌种鉴定,是不是划线更好一点呢?因为涂布容易染菌。

我觉得是,划线或稀释都可以
19楼2013-09-12 07:51:17
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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21楼: Originally posted by greenspringmi at 2013-09-12 19:57:21
如果目的是挑取单克隆做鉴定,划线比涂布要好些。

谢谢
22楼2013-09-21 22:51:44
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tangmincui

新虫 (小有名气)

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23楼: Originally posted by 人胖无罪 at 2013-09-22 15:07:11
GB20287-2006看看

恩,谢谢,
24楼2013-09-23 11:09:44
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