24小时热门版块排行榜    

查看: 7030  |  回复: 25

tangmincui

新虫 (小有名气)

[求助] 求助 细菌 10倍梯度稀释 平板该涂多少稀释液啊?

求助呀!我稀释到 10*-9,每个平板涂30ul,不知道能长不?
要是做梯度稀释,平板该涂多少?有规定吗?谢谢指点!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by tangmincui at 2013-07-03 00:31:25
我没测OD值,,因为我想获得单菌落,我想进行菌种鉴定,不知道这么做可以吗?谢谢你啊!...

菌种鉴定需要对活菌含量进行测定吗?

生理生化法鉴定的话貌似需要接菌培养,观察颜色、产气等现象;

分子生物学方法是通过提取DNA进行测序,将序列与NCBI中标准菌株进行对比看同源性

如果要获得单菌落,不应该用涂布法,而是采用平板划线法
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
8楼2013-07-03 09:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)

如果目的是挑取单克隆做鉴定,划线比涂布要好些。
21楼2013-09-12 19:57:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tangmincui: 金币+5 2013-07-03 14:11:10
估计克隆数目不会多。不知道你的菌液OD是多少,一般的菌液的浓度是10的8次方数量级的。涂多少要看你的平板大小,我一般用10cm直径的板子是涂100μl。
2楼2013-07-03 00:11:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by tangmincui at 2013-07-03 00:54:54
梯度稀释,和稀释涂布,不一样吗?我是将菌液用无菌水稀释,然后涂的。新手新手,谢谢解答!...

一样的,不过我一般用LB稀释,感觉对菌好一点。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2013-07-03 01:54:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wzq_ing

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般是用无菌水稀释,然后用100uL涂布,取哪个浓度根据母液浓度来定,开始不确定的话,先多涂几个浓度,看长出来的情况,以后根据这个情况,选择合适的两三个浓度涂,比较保险,因为每个人做的菌液浓度都可能不一样
7楼2013-07-03 08:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiyasong

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
每个平板100微升,这是国家标准上说的额。
涂板计数要选择三个合适的稀释度,每个稀释度涂三个平板。你稀释到 10*-9,可以选择 10*-9, 10*-8, 10*-7,三个稀释度进行涂板
10楼2013-07-03 10:34:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20093651

铁杆木虫 (职业作家)

用无菌生理盐水或者磷酸缓冲液稀释,取1 ml涂板或者混菌,刚从实验室做了回来
但行好事,莫问前程
14楼2013-07-03 17:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

tangmincui

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:11:54
估计克隆数目不会多。不知道你的菌液OD是多少,一般的菌液的浓度是10的8次方数量级的。涂多少要看你的平板大小,我一般用10cm直径的板子是涂100μl。

我没测OD值,,因为我想获得单菌落,我想进行菌种鉴定,不知道这么做可以吗?谢谢你啊!
3楼2013-07-03 00:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by tangmincui at 2013-07-03 00:31:25
我没测OD值,,因为我想获得单菌落,我想进行菌种鉴定,不知道这么做可以吗?谢谢你啊!...

用稀释涂布的办法是可以得到单菌落的,一般用梯度稀释,一个平板上有几十到一百个菌落比较合适。
4楼2013-07-03 00:35:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangmincui

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 00:35:22
用稀释涂布的办法是可以得到单菌落的,一般用梯度稀释,一个平板上有几十到一百个菌落比较合适。...

梯度稀释,和稀释涂布,不一样吗?我是将菌液用无菌水稀释,然后涂的。新手新手,谢谢解答!
5楼2013-07-03 00:54:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tangmincui

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-03 01:54:54
一样的,不过我一般用LB稀释,感觉对菌好一点。...

谢啦!
9楼2013-07-03 09:01:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tangmincui 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见