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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】霉菌的培养
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mercurylxl

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】霉菌的培养已有17人参与

  最近在做有关微生物方面的试验（主要培养霉菌） 从有明显霉斑的样品上用接种环挑取菌体 放到装有无菌水的小试管中 制成菌悬液 试管于4度冰箱中保存 但是隔天再将菌悬液涂布到平板上 平板上长出来的都是细菌……好郁闷呀 现在我只能用划线 但是它没有涂布那么均匀 每次从样品上挑取的量也不一样……按理来说 霉菌的孢子抗逆能力很强才对 本来想的可能是细菌长的快了一点 培养了好多天还是没长出霉菌……请教 是哪方面出了问题呀………………
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做最好的自己！！
1楼2011-02-05 13:10:20
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振我中华

铜虫 (初入文坛)
★
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会不会是接种环没有冷却啊
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生而为赢
2楼2011-02-05 13:27:20
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★ ★ ★
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silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-02-09 08:15:00
wolfebst(金币+3): 回答的不错啊，呵呵 2011-04-29 14:13:46
你采的样品可能水分含量高，利于细菌滋生，所以虽然真菌孢子耐保存，但放进水里泡着的微生物还是细菌占大头。细菌一旦把地方占了，真菌孢子被盖住了就不能再长出来了。或者再取样品时小心点，只取霉菌的孢子。再或者做稀释度梯度，如果一个梯度下细菌长满了平板，那下一个梯度就有可能在细菌菌落覆盖不到的地方长出真菌。

再或者在培养基里加点抗生素，抑制细菌生长。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-02-06 01:01:06
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mercurylxl

银虫 (小有名气)
★ ★
silicare(金币+2): 鼓励新虫参与 2011-02-09 08:15:15
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-02-06 01:01:06:
你采的样品可能水分含量高，利于细菌滋生，所以虽然真菌孢子耐保存，但放进水里泡着的微生物还是细菌占大头。细菌一旦把地方占了，真菌孢子被盖住了就不能再长出来了。或者再取样品时小心点，只取霉菌的孢子。再或 ...

当时也有想过这个原因 所以往下做了几个梯度 菌悬液稀释到十的负七次方时  最后长出来的也是细菌 而且考虑到越是往下稀释 带入杂菌的机会就越大 这样就没办法分辨到底培养出来的是样品上的细菌还是操作中带入的杂菌  现在打算用划线先分离 再做菌悬液……但是 画出来的线都是先长出细菌 然后再在上面长霉菌 给分离带来了一定的困难……   也有想过用抑菌剂 但是目前还没有找到只抑制细菌而不抑制霉菌生长的抑菌剂……
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做最好的自己！！
4楼2011-02-06 11:17:28
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★
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silicare(金币+2): 谢谢分享 2011-02-09 08:15:26
说得都很对，不过我觉得奇怪，我筛选过几百个样品，有相当一部分是长的真菌多，原因应该是样品本身的微生物里真菌含量比细菌高。当然了，培养基配方不同，也偏利于某些菌生长，不过我筛选的菌不一样，配方对你也没有参考性。不过抗生素方面你找过多少种，用量有没有摸索过，找多一些应该还是可以找得到能用得上的，什么文献啊，资料啊之类的，看看别人是怎么做的，涉及到的原理。

[ Last edited by 冼亮淀粉酶 on 2011-2-6 at 12:59 ]
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5楼2011-02-06 12:54:03
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microxy

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-02-09 08:15:34
引用回帖:
Originally posted by mercurylxl at 2011-02-06 11:17:28:


当时也有想过这个原因 所以往下做了几个梯度 菌悬液稀释到十的负七次方时  最后长出来的也是细菌 而且考虑到越是往下稀释 带入杂菌的机会就越大 这样就没办法分辨到底培养出来的是样品上的细菌还是操作中带入 ...

可能原因：1霉菌丝状的，用接种环挑取，孢子量少，建议用灭菌的解剖刀直接刮取霉变部位，涡旋后稀释涂布；2.细菌生长快，霉菌孢子萌发慢，可以控制培养温度或者设计合适的培养基；3.鉴于你的实验能够长出霉菌，就多培养几天，待到孢子很多时候，挑取划线，应该很容易分离的。
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6楼2011-02-08 10:25:14
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flightty

木虫 (正式写手)
★ ★
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silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-02-09 08:16:03
如果你只是要看霉菌卫生么不在培养基中加入抑制细菌生长的药物呢，自然环境中随意挑取的菌丝肯定是细菌数量占绝大多数啊。
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7楼2011-02-08 11:55:21
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mercurylxl

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by flightty at 2011-02-08 11:55:21:
如果你只是要看霉菌卫生么不在培养基中加入抑制细菌生长的药物呢，自然环境中随意挑取的菌丝肯定是细菌数量占绝大多数啊。

主要是做有关样品的抑菌试验 考虑到有细菌以及霉菌的共同作用于样品导致样品腐败 故做抑菌时没有把细菌和霉菌分离的特别开来 但是最近一直在想一个问题 是否应该把把细菌和霉菌分离开再做抑菌，毕竟在同一培养基上会有抑制作用 后期的致病性检测也会个容易一些。。。。。Sample TextSample Text
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做最好的自己！！
8楼2011-02-08 12:25:00
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
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你挑那一下。什么都有。  只长霉菌才奇怪呢。
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9楼2011-02-08 22:31:51
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whl6673

金虫 (小有名气)

加青霉素先把细菌抑制，霉菌和酵母就能够生长了。

★
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加青霉素先把细菌抑制，霉菌和酵母就能够生长了。
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10楼2011-02-09 13:38:41
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