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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

[求助] 关于霉菌的培养,需注意的事项?

现在要接种一种霉菌,以前没有做过,想请教一下
:
1:活化的方法?
2:保存的方法?
3:接种需要注意?
谢谢。
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yupeibin

禁虫 (正式写手)

虫子甲~~

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
魏小勇2011: 回帖置顶 非常感谢 2011-11-22 20:49:39
wolfebst(金币+5, MicEPI+1): 鼓励应助 2011-11-22 23:09:39
1活化霉菌 用PDA斜面就可以了
2 如果常用,就把斜面放冰箱保藏,不常用的话就用甘油管保藏,具体方法为将霉菌接入YPG液体培养基(酵母膏10克,蛋白胨10克,葡萄糖20克,加水1000ml),培养大概24小时,取1.8ml灭过菌的甘油保藏管,吸取700μl菌悬液加入甘油管,上面加入700μl30%灭菌过的甘油。做好标记,-20℃保藏。
3 接种注意事项:(1)霉菌产孢子,容易飞散而造成污染,霉菌接种及操作应在单独的实验室和超净台进行。尽量保持实验室安静,减少空气流动(~超净台千万不要开风~),霉菌实验室也不能使用布或类似的纤维材料的窗帘,以免粘上孢子,接种的试管不要使用棉塞,以免造成菌种交叉污染。可用耐高压的橡胶塞及试管帽可。接种多种不同霉菌时,每操作完一个要用酒精棉球擦手和台面。
(2)实验前,对有可能导致霉菌污染的材料,要认真消毒。实验后,尤其是大量培养后,除在第一时间将霉菌培养物灭菌外,还要对培养箱、接种箱、实验室进行消毒。霉菌孢子对紫外线抵抗力较强,所以通常以甲醛熏蒸,严重污染时可用10%甲醛喷雾。
(2)实验员要带好双层口罩。对有些可能致病或产毒的菌株(如黄曲霉)应有充分的了解,并作好相应的防护工作,操作过程中不要讲话,有可能会吸入部分孢子 。
能想到的就这么多了,呵呵
~~
4楼2011-11-22 18:28:04
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普通回帖

121cxh-5

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 17:19:57
魏小勇2011(金币+1): 谢谢 2011-11-22 19:52:26
活化就是在平板上再接种一下。一般冷冻保存就可以了,如果想保存久一点的话就用石蜡在试管中保藏。接种最麻烦的是杂菌污染,最好在超净台上操作。
2楼2011-11-22 16:51:16
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aribozyme

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 17:20:01
真菌的培养方法类似细菌,不过最主要的就是要无菌操作,由于真菌最容易污染了,所以对操作者和操作环境要求比较高。活化方法和细菌一样。保存真菌用冻干的方法比较好。
3楼2011-11-22 17:18:46
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魏小勇2011

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aribozyme at 2011-11-22 17:18:46:
真菌的培养方法类似细菌,不过最主要的就是要无菌操作,由于真菌最容易污染了,所以对操作者和操作环境要求比较高。活化方法和细菌一样。保存真菌用冻干的方法比较好。

冻干?
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5楼2011-11-22 20:44:01
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Aniabia

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yupeibin at 2011-11-22 18:28:04:
1活化霉菌 用PDA斜面就可以了
2 如果常用,就把斜面放冰箱保藏,不常用的话就用甘油管保藏,具体方法为将霉菌接入YPG液体培养基(酵母膏10克,蛋白胨10克,葡萄糖20克,加水1000ml),培养大概24小时,取1.8ml灭过 ...

学习了!
6楼2011-11-23 09:11:50
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