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汕头大学海洋科学接受调剂

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hia_25

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[求助] SDS-PAGE电泳

大家好，请教一个问题：最近做SDS-PAGE电泳，发现每次跑完胶，撬开薄板以后，胶的下端总是裙边状，就是比上端要宽很多，做western杂的小分子带总是弯的，不知道怎么回事，很苦恼。分离胶的浓度是10%，80V或者90V恒压跑全程，溴酚蓝前沿出胶大约需要两个半小时。开始怀疑是跑时间长了，胶太热变形了，后来冰浴跑，还是一样。请各位资深高手指教啊！

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1楼 2013-06-26 20:16:58

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myprayer

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★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-09 13:19:30

http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3978670&fpage=1
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3楼2013-06-26 22:54:37

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myprayer

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-27 20:01:24
1949stone: 回帖置顶 2013-07-09 15:11:59

可能的原因
凝胶不均匀冷却，中间冷却不好
可能装置不合适，凝胶和玻璃挡板底有bubble，或者俩遍聚合不完全

样品溶解不好
样品中含有不溶性颗粒
电极不平衡或者加样位置偏了
加样量过多

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hia_25

2楼2013-06-26 22:51:35

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青荷初想

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

用薄板做western,图一般会不好看，我们实验室一般都是用1.5mm的，图还是不错的！

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5楼2013-06-27 16:20:16

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hia_25

铁虫 (小有名气)

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引用回帖:

5楼: Originally posted by 青荷初想 at 2013-06-27 16:20:16
用薄板做western,图一般会不好看，我们实验室一般都是用1.5mm的，图还是不错的！

嗯，我们一直都用1.0的，总是有这样那样的问题，也不知道是不是这个胶板的问题。可以尝试一下，谢谢提醒

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6楼2013-07-01 10:07:55

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