版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

调剂小程序

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (6242)
>考研 (2494)
>导师招生 (1365)
>虫友互识 (166)
>休闲灌水 (166)
>文献求助 (144)
>考博 (114)
>硕博家园 (111)
>论文投稿 (71)
>基金申请 (46)
>公派出国 (46)
>教师之家 (32)
>招聘信息布告栏 (31)
>博后之家 (26)
>材料综合 (25)
>找工作 (13)

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Earl_zw

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 197.8
散金: 7
帖子: 102
在线: 61.3小时
虫号: 1706027
注册: 2012-03-21
性别: GG
专业: 生物物理、生物化学与分子

[求助] 蛋白透析后变成了褐色沉淀

我用的elution buffer: 咪唑1M，Tris-HCl 50mM(PH8.0),Nacl 0.5M.
透析baffer:Tris-HCl 50mM(PH8.0),Nacl 0.1M,DTT 1mM,甘油 10%

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

亲们，你们的包涵体蛋白透析会出现沉淀么，郁闷啊，能不能给只个招？？？已经有5人回复
食用菌多糖透析时（去完蛋白之后的多糖），底部为什么会产生沉淀？已经有6人回复
透析蛋白沉淀复性已经有22人回复
透析后蛋白沉淀已经有18人回复
分离纯化酶，硫酸铵沉淀后透析用什么样的透析袋已经有5人回复
蛋白纯化遇到问题已经有22人回复
求助硫酸铵沉淀蛋白质的问题已经有12人回复
透析袋透析蛋白后，透析袋上有沉淀的蛋白，怎么处理？已经有3人回复
蛋白经透析袋透析后出现浑浊，急求高手帮忙~！已经有12人回复
蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因已经有10人回复
蛋白纯化怎么去除核酸已经有14人回复
镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教已经有18人回复
硫酸铵沉淀后透析，里面的沉淀是什么？已经有6人回复
【讨论】急求：丝素和戊二醛的交联已经有20人回复
【求助/交流】蛋白质盐析及除盐已经有14人回复

1楼 2013-06-20 10:45:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Sunshine092

木虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
金币: 2882.9
红花: 1
帖子: 110
在线: 187.6小时
虫号: 3015492
注册: 2014-03-04
专业: 细胞信号转导

想知道这问题具体咋解决的？谢谢!

5楼2014-05-20 11:34:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 5 个回答

dcb005

金虫 (著名写手)

应助: 28 (小学生)
贵宾: 0.005
金币: 1108.8
散金: 110
红花: 2
帖子: 1850
在线: 103.1小时
虫号: 275937
注册: 2006-09-02
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

形成包涵体了，透析buffer不好，要慢慢降低盐浓度

赞一下(1人)

★穷则独善其身,达则兼济天下★

2楼2013-06-20 11:01:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

fhda142

铜虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
金币: 146.1
散金: 100
红花: 1
帖子: 196
在线: 39.2小时
虫号: 622409
注册: 2008-10-10
性别: GG
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

透析到后来是很容易出现沉淀，建议你跑个sds-page电泳检测下沉淀，看是否你的目标蛋白。还有你的透析温度，离子强度，有些蛋白会在复性之后又变得不可溶。。。。原因太多了

赞一下(1人)

3楼2013-06-20 15:40:00

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

应助: 86 (初中生)
金币: 1757.7
红花: 4
帖子: 270
在线: 73.4小时
虫号: 982579
注册: 2010-03-26
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-20 22:13:01
Earl_zw: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-06 15:03:27

褐色沉淀是NI被还原之后的颜色，因为你蛋白洗脱的时候有些蛋白的标签还结合着NI，在透析的DTT中，NI被还原。你洗脱后的蛋白中补加1mM EDTA，就不会有褐色沉淀了。给金币吧。

赞一下(2人)

4楼2013-06-20 17:06:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 5 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[考研] 298求调剂 +9	人间唯你是清欢 2026-02-28	12/600	2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
	[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10	想上岸的土拨鼠 2026-02-28	10/500	2026-03-01 14:12 by yc258
	[考研] 一志愿中南大学理学化学 +3	15779376950 2026-03-01	3/150	2026-03-01 13:47 by ALZOOZL
	[考研] 0856化工专硕求调剂 +6	董boxing 2026-03-01	6/300	2026-03-01 12:45 by houyaoxu
	[考研] 0856材料专业298分有科研经历硕士研究生调剂自荐信 +6	zyf上岸 2026-03-01	6/300	2026-03-01 12:43 by liqiongjy
	[考研] 272求调剂 +5	材紫有化 2026-02-28	5/250	2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
	[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3	虫虫虫虫虫7 2026-03-01	6/300	2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
	[考研] 寻找调剂 +4	LYidhsjabdj 2026-02-28	4/200	2026-03-01 10:56 by sunny81
	[考博] 博士自荐 +4	kkluvs 2026-02-28	4/200	2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
	[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3	更多的是 2026-02-27	4/200	2026-03-01 10:04 by ztg729
	[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3	ljplijiapeng 2026-02-27	4/200	2026-03-01 09:07 by babero
	[考研] 285求调剂 +6	满头大汗的学生 2026-02-28	6/300	2026-03-01 06:29 by Trying]
	[考研] 307求调剂 +4	73372112 2026-02-28	6/300	2026-03-01 00:04 by ll247
	[考研] 304求调剂 +3	52hz~~ 2026-02-28	5/250	2026-03-01 00:00 by 52hz~~
	[考研] 292求调剂 +3	yhk_819 2026-02-28	3/150	2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
	[考研] 264求调剂 +3	巴拉巴拉根556 2026-02-28	3/150	2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
	[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8	吃宵夜1 2026-02-28	10/500	2026-02-28 20:27 by L135790
	[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3	孙xc 2026-02-25	11/550	2026-02-28 16:57 by ichall
	[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4	礼堂丁真258 2026-02-28	6/300	2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
	[考研] 0856调剂 +3	刘梦微 2026-02-28	3/150	2026-02-28 13:22 by houyaoxu