24小时热门版块排行榜    

查看: 1663  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Earl_zw

铜虫 (小有名气)

[求助] 蛋白透析后变成了褐色沉淀

我用的elution buffer: 咪唑1M,Tris-HCl 50mM(PH8.0),Nacl 0.5M.
透析baffer:Tris-HCl 50mM(PH8.0),Nacl 0.1M,DTT 1mM,甘油 10%
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fhda142

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
透析到后来是很容易出现沉淀,建议你跑个sds-page电泳检测下沉淀,看是否你的目标蛋白。还有你的透析温度,离子强度,有些蛋白会在复性之后又变得不可溶。。。。原因太多了
3楼2013-06-20 15:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

dcb005

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
形成包涵体了,透析buffer不好,要慢慢降低盐浓度
★穷则独善其身,达则兼济天下★
2楼2013-06-20 11:01:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-20 22:13:01
Earl_zw: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-06 15:03:27
褐色沉淀是NI被还原之后的颜色,因为你蛋白洗脱的时候有些蛋白的标签还结合着NI,在透析的DTT中,NI被还原。你洗脱后的蛋白中补加1mM EDTA,就不会有褐色沉淀了。给金币吧。
4楼2013-06-20 17:06:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sunshine092

木虫 (小有名气)

想知道这问题具体咋解决的?谢谢!
5楼2014-05-20 11:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +17 chaojifeixia 2026-03-19 19/950 2026-03-23 23:26 by 呆呆师姐
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 3/150 2026-03-23 10:32 by Iveryant
[考研] 求调剂材料学硕080500,总分289分 5+3 @taotao 2026-03-19 21/1050 2026-03-23 10:17 by 冠c哥
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂,一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
请填处理意见