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16srDNA

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 如何做2个定点突变（2个终止密码子换掉）

读文献有几个问题不太懂，特向各位大神求助

有一段目的基因待表达 (支原体的一段基因，要在大肠杆菌中表达），表达前要把这段基因的2个终止密码子换掉，文献中用了3对引物（1对flanking region引物，2对含有mutation引物--每对引物都是overlap的），我的问题是这两个定点突变是怎么做的？

希望大神们帮帮忙，小女子拜谢
附上那篇文献

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附件 1 : RGD_Motif_of_Lipoprotein_T,_Involved_in_Adhesion_of_Mycoplasma_conjunctivae_to_Lamb_Synovial_Tissue_Cells__†_-_副本.pdf

2013-06-15 18:52:22, 402.03 K