应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体构建问题
81/1返回列表
查看: 1054  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

mmzhang

新虫 (小有名气)

[求助] 载体构建问题

目前在构建基因表达载体，遇到如下问题，希望大虾们能够帮帮忙。
构建了某基因的超表达载体（用的是pCAMBIA1300改造后的载体），经测序后序列没有问题，但是转化农杆菌后却没有克隆，已经重复做了几次，都是同样的结果。以我目前的经验，实在是不知道什么原因了。
PS: 1、该基因在酵母表达载体中正常表达；2、其它基因用的也是pCAMBIA1300改造后的载体，转化后能够正常生长。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-14 11:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玲珑琉璃

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:04:27
mmzhang: 金币+2 2013-06-16 18:32:50
你再借个质粒做阳性对照，一起转化农杆菌吧，看是不是农杆菌感受态的问题。
或者你从别的实验室借个农杆菌感受态，一起转了，如果有，给你省点时间。
赞一下 回复此楼
一个不成熟男人的标志是他愿意为某种事业英勇地死去，一个成熟男人的标志是他愿意为某种事业卑贱地活着。━━━塞林格
2楼2013-06-14 11:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nobodykqq

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mmzhang(myprayer代发): 金币+1, Send one rose fragrance in hand, thank you loosen one's purse strings generously, look forward to your wonderful 2013-06-14 14:04:38
mmzhang: 金币+2 2013-06-16 18:32:54
把空载和重组质粒同时转化农杆菌后看结果。
赞一下 回复此楼
拒绝平庸，追求卓越！
3楼2013-06-14 12:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmzhang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 玲珑琉璃 at 2013-06-14 11:48:57
你再借个质粒做阳性对照，一起转化农杆菌吧，看是不是农杆菌感受态的问题。
或者你从别的实验室借个农杆菌感受态，一起转了，如果有，给你省点时间。

农杆菌感受态没问题的，因为转了其他基因的载体都能长。
赞一下 回复此楼
4楼2013-06-14 12:03:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

玲珑琉璃

铜虫 (正式写手)
那是你基因的问题？
赞一下 回复此楼
一个不成熟男人的标志是他愿意为某种事业英勇地死去，一个成熟男人的标志是他愿意为某种事业卑贱地活着。━━━塞林格
5楼2013-06-14 19:01:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmzhang

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 玲珑琉璃 at 2013-06-14 19:01:48
那是你基因的问题？

不晓得呢，从来没遇到过这样的情况。
赞一下 回复此楼
6楼2013-06-16 18:33:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmzhang

新虫 (小有名气)
请大侠们帮帮忙嘞
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-17 10:11:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mmzhang

新虫 (小有名气)
自己顶！
回复此楼
8楼2013-06-19 21:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mmzhang 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 4/200 2026-08-30 20:21 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 4FFAWE8HcgUD 2026-08-29 3/150 2026-08-30 20:10 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zICmwzsBXjbN 2026-08-29 5/250 2026-08-30 20:08 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 5/250 2026-08-30 19:37 by hZiFeudZyoGR
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 19:34 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 18:53 by hZiFeudZyoGR
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 5/250 2026-08-30 18:40 by hZiFeudZyoGR
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 18:17 by hZiFeudZyoGR
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +3 雨打竹帘 2026-08-30 4/200 2026-08-30 12:35 by 白大多亮
[基金申请] 29号明天会评吗 +3 笨笨唐 2026-08-28 3/150 2026-08-30 09:29 by cww8181
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭