24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3302  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 原核表达做不出来了!

去年构建了重组菌做原核表达,载体是pET28a,宿主菌是BL21,诱导都能得到高浓度的蛋白,之前只是纠结纯化结果不是很理想,谁知道最近一个多月,做了很多次表达,都不能表达出目的蛋白,送测序又没有问题,快崩溃了!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

你的日子如何,你的力量也必如何!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zx1984 at 2013-06-07 16:52:49
可以换个感受态细胞重新转化一下试试,或者看看结构两端是否有对结构、功能没有影响到序列截去,在表达试试。有很多蛋白不好纯化,我有2个蛋白两年多了还没能很好的纯化出来。

我只有两种BL21,因为现在用的一直都没问题所以就没有试过另外一种。我也是打算抽提质粒重新转化看看
怎么看结构?因为测序没问题,所以我一直没有考虑这方面的问题
你的日子如何,你的力量也必如何!
8楼2013-06-07 23:27:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-06 11:46:34
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:33:34
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:36:53
重新转化一下,你的细胞,千万别使用错细胞一定是DE3溶源菌。这种情况很少的,哪有之前可以表达现在不能表达啊。
2楼2013-06-06 10:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bio海盗路飞

木虫 (小有名气)

是不是诱导剂出问题了?
努力工作,让自己每天都能进步!
3楼2013-06-06 15:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:30:56
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-10 16:59:12
有可能是渗漏表达的影响,重新提质粒、转化,再进行表达。
小兵一个
4楼2013-06-06 16:50:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +11 匹克i 2026-03-23 11/550 2026-03-30 17:05 by 晴空210210
[考研] 291求调剂 +8 HanBeiNingZC 2026-03-24 8/400 2026-03-30 17:01 by 无际的草原
[考研] 071010 323 分求调剂 +3 Baekzhy 2026-03-27 3/150 2026-03-30 14:24 by andresqi
[考研] 0703化学 +14 妮妮ninicgb 2026-03-27 14/700 2026-03-30 12:46 by fangnagu
[考研] 348求调剂 +6 小懒虫不懒了 2026-03-28 6/300 2026-03-30 10:29 by Evan_Liu
[考研] 327求调剂 +6 汲亦昊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 13:40 by peike
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 348求调剂 +4 小懒虫不懒了 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:47 by 果果妈咪
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
请填处理意见