24小时热门版块排行榜    

查看: 3583  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 原核表达做不出来了!

去年构建了重组菌做原核表达,载体是pET28a,宿主菌是BL21,诱导都能得到高浓度的蛋白,之前只是纠结纯化结果不是很理想,谁知道最近一个多月,做了很多次表达,都不能表达出目的蛋白,送测序又没有问题,快崩溃了!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

你的日子如何,你的力量也必如何!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx1984

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sxxuan: 金币+2, 有帮助 2013-06-07 23:27:34
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-06-10 16:59:23
可以换个感受态细胞重新转化一下试试,或者看看结构两端是否有对结构、功能没有影响到序列截去,在表达试试。有很多蛋白不好纯化,我有2个蛋白两年多了还没能很好的纯化出来。
7楼2013-06-07 16:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

stevenshi021

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-06-06 11:46:34
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:33:34
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:36:53
重新转化一下,你的细胞,千万别使用错细胞一定是DE3溶源菌。这种情况很少的,哪有之前可以表达现在不能表达啊。
2楼2013-06-06 10:01:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Bio海盗路飞

木虫 (小有名气)

是不是诱导剂出问题了?
努力工作,让自己每天都能进步!
3楼2013-06-06 15:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linxt2005

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sxxuan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-06-07 23:30:56
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-06-10 16:59:12
有可能是渗漏表达的影响,重新提质粒、转化,再进行表达。
小兵一个
4楼2013-06-06 16:50:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见