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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 为什么琼脂糖凝胶电泳跑出来的条带暗？
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「°諃ル.」

铁杆木虫 (职业作家)

ゃōゃ我们会幸福哒 ...

[求助] 为什么琼脂糖凝胶电泳跑出来的条带暗？

我用1%，1.5%的胶，80V 30min都跑了好几次，175kb的目的条带都暗，请问应该用浓度是多少的琼脂糖凝胶呢？还是其他什么原因呢？
TBE我用的生工的，试剂盒用的天根的，我是按照说明书的步骤来做的，请问是不是我稀释的时候用的水太多了呢，但是稀释的补足的水我也是按照说明书来加的。
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oo○o○就算跌倒，也要豪迈的笑。*^__^*
1楼 2013-05-29 13:01:03
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「°諃ル.」

铁杆木虫 (职业作家)

ゃōゃ我们会幸福哒 ...
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by ujsyangyong at 2013-05-30 08:35:14
你看看marker强度怎么样，是不是EB染的不够？你的EB是配在胶里面还是后来染的？如果配在胶里面，跑的时间长了，小条带都会比较暗。因为EB在胶中与DNA泳动方向相反。

我制6X6的胶，60℃左右的时候加0.8ul 的golewive，昨天我用2%的胶跑，效果比1%、1.5%的稍微亮点，但是还是暗，marker 100bp，200bp条带也暗，不过比我的目的条带稍微亮一点，我提RNA之后跑电泳条带还不错，我才做逆转录和PCR的
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oo○o○就算跌倒，也要豪迈的笑。*^__^*
3楼2013-06-01 04:16:55
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ujsyangyong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
「°諃ル.」(寻梦五世代发): 金币+2, 感谢应助 2013-05-30 14:36:29
你看看marker强度怎么样，是不是EB染的不够？你的EB是配在胶里面还是后来染的？如果配在胶里面，跑的时间长了，小条带都会比较暗。因为EB在胶中与DNA泳动方向相反。
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「°諃ル.」
实验，实验，还是实验！
2楼2013-05-30 08:35:14
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