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半生一梦木虫 (小有名气)
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[求助]
原核表达跑胶检测不到产物
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本人从去年11月份断断续续做原核表达至今 一直都没有成功表达 目的基因连接的是pet-28a载体 受体细胞选择bl21(de3) 载体和大肠杆菌实验室的师姐都用来做过表达 是ok的 表达载体在转到bl21(de3)之前也送去测序过 没有问题 诱导条件也尝试过37度3h和20度18h两种 iptg浓度从0.1mM到1mM也做过优化 来来回回page胶跑了也有十几二十块了 自己做的胶没有跑出来 拜托师姐做的胶也没跑出来 所以一直很纠结啊 求高人指点！ |
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