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[求助]
『求助』酶活测定遇到困难
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在次向各位牛人求助： 最近在做一个脂酰CoA合成酶的酶活分析，体系是60 mM PBS containing 10 mM MgCl2, 5 mM ATP, 2.5 mM DTT, 1 mM CoASH, 0.1 mM fatty acid和2ug的重组蛋白，30度反应1h；蛋白只有一个his tag，理论上不会对活性有太大影响，但用LC—MS根本测不到一点产物，分析了好久也找不到原因，真的是走投无路啊。由于CoA是水溶的，所以不知道里面的盐离子会不会产生影响，不知道有什么好的抽提萃取方式。 |
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