Sample Text
最近的实验遇到了一个很怪的问题,我对载体pAcGFP1进行线性化PCR,然后切胶回收,用的是QIAGEN胶回收试剂盒,200ul的PCR体系,40ul EB洗脱后,浓度在110ng/ul左右,电泳验证也没有问题。但是当我对其高温加热时,也就是只加buffer和水,放入PCR仪,运行PCR程序,5个循环,约30min,再跑电泳,回收产物就变成弥散状态,没有主带;我用乙醇沉淀回收的PCR产物,做同样实验,DNA就会稳定存在。请问各位分子高手,是切胶回收过程对DNA造成损伤了吗?导致其在高温下不稳定?有没有遇到同样情况的同学啊?帮忙分析一下啊~~跪求!!
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