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白杨常成

新虫 (初入文坛)

[求助] westernblot的新发现 已有4人参与

请教各位同仁,做westernblot时,如果分子量约300kd,如何配胶呢。配胶浓度多少,有什么好的办法没,希望各位能帮帮我,非常感谢。
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gyesang

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优秀版主优秀版主

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-06 14:48:48
gyesang: 回帖置顶 2013-05-06 15:56:38
网上流传着这样一张图片,SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图,楼主可以参考哈!

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-05-06 02:02:00
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-05-06 14:48:37
先用6%的PAGE胶试试。实在不行的话跑琼脂糖胶。
2楼2013-05-06 01:27:03
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sl35537417

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用6%的胶   直到低分子量的marker(如80.100KD)跑出去  试一下
4楼2013-05-06 08:24:39
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senix

木虫 (小有名气)

有一定难度哦~~
做实验就是和上帝玩游戏!
5楼2013-05-06 13:21:28
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白杨常成

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-05-06 02:02:00
网上流传着这样一张图片,SDS-PAGE胶浓度与对蛋白的分辨率对应图,楼主可以参考哈!

好的,谢谢您
6楼2013-05-06 22:24:57
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白杨常成

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-06 01:27:03
先用6%的PAGE胶试试。实在不行的话跑琼脂糖胶。

嗯,琼脂糖胶怎么配呢,第一次听说,这个可以通过电泳让蛋白跑出来吗,大概原理是什么,和SDSPAGE一样吗?初为新手,望师兄指教。
7楼2013-05-06 22:26:31
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白杨常成

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sl35537417 at 2013-05-06 08:24:39
可以用6%的胶   直到低分子量的marker(如80.100KD)跑出去  试一下

好的,我试试,谢谢您,后续问题,望师兄多多指教。
8楼2013-05-06 22:27:55
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)


gyesang: 编辑内容 2013-05-07 00:51
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-05-07 00:51:49
引用回帖:
7楼: Originally posted by 白杨常成 at 2013-05-06 22:26:31
嗯,琼脂糖胶怎么配呢,第一次听说,这个可以通过电泳让蛋白跑出来吗,大概原理是什么,和SDSPAGE一样吗?初为新手,望师兄指教。...

琼脂糖胶适用于分离大分子,比如DNA、RNA。如果蛋白特别大也可以用。

[ Last edited by gyesang on 2013-5-7 at 00:51 ]
9楼2013-05-07 00:33:48
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