版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zhuqinjian

金虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 1626
散金: 200
红花: 1
帖子: 201
在线: 146.6小时
虫号: 2142112
注册: 2012-11-22
性别: GG
专业: 微生物遗传育种学

[求助] SaII和BamHI双酶切切不开

我用T载体与目的片段连接后，导入JM109中，用菌落PCR也能P出目的片段，提取质粒后PCR也能P出来，电泳跑出来的片段也正确（环状片段跑出来有3条带），但是用SaII和BamHI双酶切就是切不出来，只有一条带。求大神指导啊？是不是只是单酶切了啊？为啥双酶切切不出来呢？

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

Nhe I和Hind III 双酶切pcDNA3.1(+)和目的片段2300bp，却连不上，求各位帮忙啊已经有17人回复
pET28a双酶切后连接目的基因，什么也不长。。。已经有23人回复
连接检测时双酶切总是切不开已经有9人回复
崩溃了难题跪求解答：质粒提不出，酶切切不开已经有30人回复
Xho1和EcoR1双酶切，切不开已经有14人回复
双酶切，切不下来已经有19人回复
质粒酶切切不动，质粒在宿主中繁衍酶切位点会突变么？已经有8人回复
质粒PCR大小正确，可是双酶切切不开已经有8人回复
双酶切粘性末端连接不上已经有21人回复
双酶切连TA后切不开已经有13人回复
双酶切看不到小片段，为什么？已经有19人回复
不同公司的内切酶可用于双酶切吗已经有3人回复
求助：关于BamHI SalI 双酶切的问题已经有16人回复
将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？已经有13人回复
双酶切，体系，切不出来已经有10人回复
【求助/交流】BamHI酶切已经有27人回复
【求助/交流】大家有没有用过Xba 1 和 BamH 1我怎么切不开啊~~急~ 已经有21人回复

坚定方向，坚持下去

1楼 2013-05-02 08:44:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sd3824289

木虫 (正式写手)

应助: 47 (小学生)
金币: 2304.1
散金: 33
帖子: 740
在线: 105.5小时
虫号: 1657712
注册: 2012-03-02
专业: 生物化学

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-04 19:30:01

4楼的方法挺好的，先用PCR方法确定一下有没有插入片段，在进行质粒酶切。如果切不开，可以适当延长一下酶切时间试一下！

坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！

10楼2013-05-04 10:24:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主 zhuqinjian 的主题更新