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cjf-88

银虫 (初入文坛)

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[求助] Not I/BamH I双酶切体系缓冲液的选择问题

如题，查了Takara中Double Digestion(双酶切反应)时Universal Buffer(通用缓冲液)的使用表，Not I/BamH I双酶切体系通用缓冲液为：0.5×K+BSA，Not I 酶一般反应体系中的0.1% TritonX-100还用不用加？假如在20μl反应体系中，有10×K Buffer，0.1% BSA ，0.1% TritonX-100，各试剂应加多少量？
麻烦大家了！

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1楼 2013-04-20 19:17:51

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curiousdog

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

8楼: Originally posted by cjf-88 at 2013-04-22 18:05:25
NEB公司？我们用的是TaKaRa的，购买的酶都有附带buffer的吧?...

带Buffer啊。我们用NEB的。大多数用buffer 4就行，可以去查双酶切buffer表

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理可顿悟，事须渐修。

9楼2013-04-22 19:05:14

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cjf-88

银虫 (初入文坛)

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求帮助啊！谢谢大家了！

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2楼2013-04-21 16:04:27

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senix

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流，期待你的精彩1 2013-04-22 08:49:34
cjf-88: 金币+5, ★有帮助, 谢谢 2013-04-28 23:25:39

不用加，直接用Universal Buffer(通用缓冲液)，不用加0.1% TritonX-100！

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做实验就是和上帝玩游戏！

3楼2013-04-21 21:21:45

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cjf-88

银虫 (初入文坛)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by senix at 2013-04-21 21:21:45
不用加，直接用Universal Buffer(通用缓冲液)，不用加0.1% TritonX-100！

谢谢！请问20μl反应体系中10×K Buffer是加1μl吧？那0.1% BSA 是加2μl还是1μl?

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4楼2013-04-21 22:28:25

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