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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

[求助] 真菌菌丝离心问题

各位,在下在做真菌的菌丝提取实验,通过缓冲液提取振摇提取后,采用离心沉淀菌体,发现在12000rpm转速下离心10min溶液里面还是有菌丝体,请问该怎么做才能把菌丝体最大的沉淀下来呢,除了加大离心速度、时间之外,有没有什么其他的办法,有没有什么缓冲液加进去之后菌丝体会沉淀的??
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只为活个问心无愧。。
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huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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TLC菜鸟: 金币+5, 有帮助, 硫酸锌 氯化钙 硅藻土 珍珠岩的作用是什么呀,其实我只是想要具体,因为我菌体还 有破坏 2013-03-27 21:40:45
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助交流! 2013-03-30 10:33:49
加点硫酸锌 氯化钙  硅藻土  珍珠岩   欧了。再就是你要的东西看来是胞内胞外都有,再就是你用什么提取的。你单单这么说,不好确定你的方法是否合适阿。
2楼2013-03-27 13:42:21
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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TLC菜鸟: 金币+5, 有帮助, 其实我只是想要具体,因为我菌体还没有破坏,想最大程度得到菌体 2013-03-27 21:41:36
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助交流! 2013-03-30 10:34:22
我提个意见不知道对不对,你经过了震荡提取,说明你离心后是想去除菌丝体的,也就是目标产物是在胞内的,那么可不可以采用过滤而非离心。楼上说的这些方法是改善过滤的吧?就像是用活性炭脱色一样,离心你是离不下来的,只能抽滤
3楼2013-03-27 16:47:52
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huaqiangliu at 2013-03-27 13:42:21
加点硫酸锌 氯化钙  硅藻土  珍珠岩   欧了。再就是你要的东西看来是胞内胞外都有,再就是你用什么提取的。你单单这么说,不好确定你的方法是否合适阿。

菌体还没有破坏
只为活个问心无愧。。
4楼2013-03-27 21:41:18
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那从你说的来看,是不是可以考虑用抽滤的方法,一般合成上得到菌体,抽滤是最常用的方法,当然,真菌发酵产物可能存在粘度大的问题,不知道你的产物的状态是什么样的
5楼2013-03-28 08:34:42
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wentanbaodao at 2013-03-28 08:34:42
那从你说的来看,是不是可以考虑用抽滤的方法,一般合成上得到菌体,抽滤是最常用的方法,当然,真菌发酵产物可能存在粘度大的问题,不知道你的产物的状态是什么样的

抽滤需要什么装置呢?
抽滤之后怎么回收菌体呀?
只为活个问心无愧。。
6楼2013-03-28 09:34:08
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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6楼: Originally posted by TLC菜鸟 at 2013-03-28 09:34:08
抽滤需要什么装置呢?
抽滤之后怎么回收菌体呀?...

用真空泵抽啊。。。
我以前用过滤纸来过滤,过滤完直接刮下来。。。
7楼2013-03-28 11:20:09
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by TLC菜鸟 at 2013-03-28 09:34:08
抽滤需要什么装置呢?
抽滤之后怎么回收菌体呀?...

抽滤到干,你见合成上他们经常抽到最后都很干了,直接刮下来了。很好用的方法,但我说了,你的整个发酵液的状态是什么样
8楼2013-03-28 17:00:32
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

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TLC菜鸟: 金币+2, 有帮助 2013-03-30 20:55:55
其实很多真菌培养后都是这样的,有些菌体培养完离心时几乎没用,菌丝体密度与培养基密度大致一样。因此,最好最方便的办法就是抽滤,效果非常好。小量的一个真空泵、一个抽滤瓶加一个布氏漏斗就OK了。
转向地质微生物学
9楼2013-03-28 20:22:48
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lcat

木虫 (小有名气)

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★ ★
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TLC菜鸟: 金币+2 2013-03-30 20:56:07
滤纸或者砂芯漏斗,真空泵抽滤,然后洗下来就可以啦
10楼2013-03-29 15:36:02
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