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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

[求助] 真菌代谢产物提取方法?

我想做真菌代谢产物提取实验,请问哪位做过?能否分享方法呢?我主要做的是镰刀菌,万分感谢!
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f_luckyboy

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wolfebst(金币+3): 鼓励新虫多多参与讨论 2011-05-10 14:38:46
H-xiangzhu(金币+1): 嗯谢谢你~~我是想鉴定代谢成分的,需要了解下方法。 2011-05-11 02:28:06
除了经验和方法你还需要别的吗?
2楼2011-05-10 14:08:22
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fwks

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-05-22 07:52:00
rainwander(EPI+1): 2011-05-22 07:52:06
1.首先大规模发酵(10L),固体培养或者液体培养皆可,28度培养
2、收集菌块,泡于甲醇/乙酸乙酯/乙酸做萃取液,连续泡若干日,每次以水萃取
3、得到的粗提物再用醇或乙酸乙酯划段,分别蒸干
4、通过正反向硅胶柱或者分子筛进一步筛选,必要时可结合高效液相。
5、得到化合物纯度足够,则可去进行质谱或者核磁谱检测,最终确定分子量和化学结构。
3楼2011-05-10 21:43:50
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ufowinner

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3): 鼓励交流 2011-05-22 07:52:31
rainwander(EPI+1): 2011-05-22 07:52:37
1. 离心 菌丝和发酵上清分开处理
2. 菌丝用酸处理破壁,乙酸乙脂萃取,过固相萃取柱,液相分析或者制备液相收集
3. 发酵上清的步骤和上面相似。你如果想得到挥发性的顶空微萃取后上气相了。
  分析为主,大量制样貌似要过柱子了。
7楼2011-05-21 23:35:08
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普通回帖

郝钊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这个问题太难回答了。都不知道你到底要什么样的代谢产物,性质如何。只有知道大体你要的什么东西,根据特性去分才可以,要不然无从下手啊。你都不知道你到底是要胞内的还是胞外的,初级代谢产物还是次级代谢产物等等。
4楼2011-05-10 23:32:39
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by fwks at 2011-05-10 21:43:50:
1.首先大规模发酵(10L),固体培养或者液体培养皆可,28度培养
2、收集菌块,泡于甲醇/乙酸乙酯/乙酸做萃取液,连续泡若干日,每次以水萃取
3、得到的粗提物再用醇或乙酸乙酯划段,分别蒸干
4、通过正反向硅胶 ...

嗯,谢谢,请问有什么要注意的问题吗?
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5楼2011-05-11 02:29:42
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H-xiangzhu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 郝钊 at 2011-05-10 23:32:39:
你这个问题太难回答了。都不知道你到底要什么样的代谢产物,性质如何。只有知道大体你要的什么东西,根据特性去分才可以,要不然无从下手啊。你都不知道你到底是要胞内的还是胞外的,初级代谢产物还是次级代谢产物 ...

不好意思,这个领域我比较陌生,表达不清楚,谢谢你,我需要的是此生代谢产物,胞外和胞内的都要,胞外的主要是要得到一些挥发性物质
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6楼2011-05-11 02:31:50
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

晕,太难回答了
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2011-05-22 02:24:47
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笨笨达达

银虫 (小有名气)

你是固体发酵还是液体发酵?
9楼2011-08-11 18:51:48
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笨笨达达

银虫 (小有名气)

你最终的目的是得到活性的单体化合物还是其他分析之类的?
10楼2011-08-11 18:52:51
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