24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4302)
>文献求助 (419)
>导师招生 (319)
>虫友互识 (241)
>论文投稿 (145)
>考博 (135)
>博后之家 (124)
>休闲灌水 (119)
>硕博家园 (91)
>考研 (90)
>公派出国 (88)
>基金申请 (72)
>教师之家 (65)
>论文道贺祈福 (61)
>找工作 (52)
>招聘信息布告栏 (33)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

hsd3521

主管区长 (知名作家)

[交流] 色谱柱柱压异常高，尝试了多种办法，请教高人

柱子型号：Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles)
进样：植物蛋白粗提液，过0.45膜
流动相：70%水30%乙腈，结束试验后用100%乙腈冲洗
问题：用了两三天后，柱压奇高，达到220左右，用100%乙腈冲洗，柱压正常，在45-48之间
采取措施：超声筛板，无用；反相冲洗，无用；低流速5%甲醇冲洗两天后，采用流动相仍在190左右
所以，在此请高人指点，如果操作，为什么100%乙腈冲洗时正常，柱子真得堵了吗？
附件是我在网上搜集的液相色谱柱的清洗与再生方法，感谢大家，在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ]

回复此楼

» 本帖附件资源列表

欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
附件 1 : 高效液相色谱柱清洗与再生方法.pdf

2013-03-26 07:53:31, 966.76 K

» 猜你喜欢

Fe3O4@SiO2合成已经有6人回复
国家级人才课题组招收2026年入学博士已经有4人回复
青年基金C终止已经有4人回复
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？已经有7人回复
为什么nbs上溴没有产物点出现呢已经有10人回复
救命帖已经有11人回复
招博士已经有5人回复
26申博求博导推荐-遥感图像处理方向已经有4人回复
限项规定已经有7人回复
西南交通大学国家级人才团队2026年博士研究生招生（考核制）—机械、材料、力学方向已经有3人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-03-24 09:06:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

张鑫1982

至尊木虫 (文坛精英)

应助: 32 (小学生)
金币: 35738.6
帖子: 21844
在线: 435.6小时
虫号: 1120174

我遇到过。你分析的样品里肯定有物质不适合C4，不可逆的与填料结合了。

赞一下

回复此楼

20楼2013-03-27 19:50:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 24 个回答

heyo_123

至尊木虫 (职业作家)

应助: 107 (高中生)
贵宾: 0.565
金币: 14674
帖子: 3244
在线: 1284.6小时
虫号: 810494

★
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-03-24 14:53:08

让我猜一下，没测过蛋白，但可能是如下原因：
1.你所分析的蛋白，在乙腈中溶解性好，但在水中，可能会析出，在你现在的色谱条件下，使用时间长，肯定会堵柱。
建议接一个保护柱。
测试你的样品的溶解性，溶于水吗？
柱压高？真是柱的原因吗？取下柱子，看看柱压。
再说低流速的甲醇水，5% 也有点太低了吧？虽然你的柱可以用水冲，但还是有机相比例高些好点吧...