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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 怎么我养的细胞容易漂？
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1466822597

银虫 (小有名气)

[求助] 怎么我养的细胞容易漂？

最近刚开始养肿瘤细胞，MCF-7，Bxpc-3，C26，等不同的细胞都再养。但本人技术不行。总是会有一点漂的，所有的都漂，用的不同培养基的也漂。真心困扰我，担心实验做不好。
试验方法是参照网上和以前同学的。先消化，再离心，加入培养基，然后传代。在生物安全柜操作。全部东西灭菌。
可还是有问题！

想请养细胞的高手说说，还有什么注意事项，你们以前遇到过这种问题不？一般是哪里出了问题。
求指导！！！！！
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找到真爱
1楼 2013-03-22 14:51:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cby-1979

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你养别的细胞都没问题的话，那只可能是培养基或是细胞的问题，肿瘤细胞一般挺好养的，可以做些对照，找找原因。另外，消化确实和人、细胞都有关系，你得多做去摸索。
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虫小力气大
4楼2013-03-28 07:46:00
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mmhhhxf

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1466822597: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-29 11:24:18
细胞状态不好的话，你可以适当的增加细胞浓度，浓度太小的话细胞就是长得不好，铁皮细胞也是一样，如果状态不好的话，你可以隔一天处理一次不要处理的太频繁，要给细胞生长的时间。
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6楼2013-03-28 16:04:25
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普通回帖

美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-03-23 08:09:38
如果你说的是刚传代时细胞贴壁不好，就增加血清浓度，如果是培养一两天后，你就需要改善细胞培养环境了
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2楼2013-03-22 15:57:17
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-23 08:09:30
胰酶消化时间不能太久；消化完成后，对无法直接拍落的细胞，吹打不要太猛；血清非常关键，选择声誉好的牌子，且浓度不宜过低；细胞数量不能过多，否则必然会飘。
另外，培养瓶和培养皿也要注意。玻璃培养瓶必须充分洁净，一次性产品选个好牌子就行了，比如Corning、耐思都可以。
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3楼2013-03-22 19:37:11
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chnfhjxl

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1466822597: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-29 10:57:36
我养的细胞就出现过这样的情况，长得慢容易飘也不是污染，更换了所有的东西和尝试了所有的办法都没法解决。我就是弄到别人细胞房重新复苏了一下，在别人那里就养得很好了。可能是实验室的大环境就是有问题的
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5楼2013-03-28 09:19:43
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1466822597

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cby-1979 at 2013-03-28 07:46:00
如果你养别的细胞都没问题的话，那只可能是培养基或是细胞的问题，肿瘤细胞一般挺好养的，可以做些对照，找找原因。另外，消化确实和人、细胞都有关系，你得多做去摸索。

谢谢谢谢！我现在也怀疑自己的操作不过关。
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找到真爱
7楼2013-03-29 10:56:00
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1466822597

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by chnfhjxl at 2013-03-28 09:19:43
我养的细胞就出现过这样的情况，长得慢容易飘也不是污染，更换了所有的东西和尝试了所有的办法都没法解决。我就是弄到别人细胞房重新复苏了一下，在别人那里就养得很好了。可能是实验室的大环境就是有问题的

哦，原来大环境也有影响，知道了。谢谢啦。
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找到真爱
8楼2013-03-29 10:57:24
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1466822597

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mmhhhxf at 2013-03-28 16:04:25
细胞状态不好的话，你可以适当的增加细胞浓度，浓度太小的话细胞就是长得不好，铁皮细胞也是一样，如果状态不好的话，你可以隔一天处理一次不要处理的太频繁，要给细胞生长的时间。

这样啊，知道了。
我还有一个问题：细胞有黑点，可以随培养基动，但不是黑胶虫。请问这种情况您遇到过吗？如果细胞还想要，有什么补救措施吗？
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找到真爱
9楼2013-03-29 11:23:31
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mmhhhxf

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

那个黑点，对细胞生长应该没有影响。
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10楼2013-03-30 17:21:27
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