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1466822597

银虫 (小有名气)

[求助] 怎么我养的细胞容易漂?

最近刚开始养肿瘤细胞,MCF-7,Bxpc-3,C26,等不同的细胞都再养。但本人技术不行。总是会有一点漂的,所有的都漂,用的不同培养基的也漂。真心困扰我,担心实验做不好。
试验方法是参照网上和以前同学的。先消化,再离心,加入培养基,然后传代。在生物安全柜操作。全部东西灭菌。
可还是有问题!

想请养细胞的高手说说,还有什么注意事项,你们以前遇到过这种问题不?一般是哪里出了问题。
求指导!!!!!
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cby-1979

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你养别的细胞都没问题的话,那只可能是培养基或是细胞的问题,肿瘤细胞一般挺好养的,可以做些对照,找找原因。另外,消化确实和人、细胞都有关系,你得多做去摸索。
虫小力气大
4楼2013-03-28 07:46:00
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mmhhhxf

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1466822597: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-29 11:24:18
细胞状态不好的话,你可以适当的增加细胞浓度,浓度太小的话细胞就是长得不好,铁皮细胞也是一样,如果状态不好的话,你可以隔一天处理一次不要处理的太频繁,要给细胞生长的时间。
6楼2013-03-28 16:04:25
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普通回帖

美丽传说

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 鼓励发帖交流 2013-03-23 08:09:38
如果你说的是刚传代时细胞贴壁不好,就增加血清浓度,如果是培养一两天后,你就需要改善细胞培养环境了
2楼2013-03-22 15:57:17
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vir2008

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-03-23 08:09:30
胰酶消化时间不能太久;消化完成后,对无法直接拍落的细胞,吹打不要太猛;血清非常关键,选择声誉好的牌子,且浓度不宜过低;细胞数量不能过多,否则必然会飘。
另外,培养瓶和培养皿也要注意。玻璃培养瓶必须充分洁净,一次性产品选个好牌子就行了,比如Corning、耐思都可以。
3楼2013-03-22 19:37:11
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chnfhjxl

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1466822597: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-29 10:57:36
我养的细胞就出现过这样的情况,长得慢容易飘也不是污染,更换了所有的东西和尝试了所有的办法都没法解决。我就是弄到别人细胞房重新复苏了一下,在别人那里就养得很好了。可能是实验室的大环境就是有问题的
5楼2013-03-28 09:19:43
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1466822597

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cby-1979 at 2013-03-28 07:46:00
如果你养别的细胞都没问题的话,那只可能是培养基或是细胞的问题,肿瘤细胞一般挺好养的,可以做些对照,找找原因。另外,消化确实和人、细胞都有关系,你得多做去摸索。

谢谢谢谢!我现在也怀疑自己的操作不过关。
找到真爱
7楼2013-03-29 10:56:00
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1466822597

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by chnfhjxl at 2013-03-28 09:19:43
我养的细胞就出现过这样的情况,长得慢容易飘也不是污染,更换了所有的东西和尝试了所有的办法都没法解决。我就是弄到别人细胞房重新复苏了一下,在别人那里就养得很好了。可能是实验室的大环境就是有问题的

哦,原来大环境也有影响,知道了。谢谢啦。
找到真爱
8楼2013-03-29 10:57:24
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1466822597

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mmhhhxf at 2013-03-28 16:04:25
细胞状态不好的话,你可以适当的增加细胞浓度,浓度太小的话细胞就是长得不好,铁皮细胞也是一样,如果状态不好的话,你可以隔一天处理一次不要处理的太频繁,要给细胞生长的时间。

这样啊,知道了。
我还有一个问题:细胞有黑点,可以随培养基动,但不是黑胶虫。请问这种情况您遇到过吗?如果细胞还想要,有什么补救措施吗?
找到真爱
9楼2013-03-29 11:23:31
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mmhhhxf

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

那个黑点,对细胞生长应该没有影响。
10楼2013-03-30 17:21:27
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