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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 养细胞养地好烦
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NANASS

银虫 (小有名气)

[交流] 养细胞养地好烦

最近在养胃癌细胞AGS，状态一直不好，好不容易长起来，胰酶消化后，竟然一大片都从培养瓶上掉下来，并不是分散成单个细胞，好苦恼啊！！而且培养时会有点点，都快晕了！万恶的细胞呀！大家有没有遇到此种情况，还望指点迷津。。。谢谢大家！
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1楼 2011-12-04 11:45:25
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fxgowen

金虫 (小有名气)
★
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没做过癌细胞实验，楼主还是不要着急，其实和养菌一样，找到规律自然就能养好了
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2楼2011-12-04 15:45:19
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btx362237729

金虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-12-04 18:49:44
我今天才开始正式养细胞。。。。。。细胞比养大肠杆菌麻烦无数倍
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3楼2011-12-04 18:48:14
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sansei_stone

金虫 (正式写手)
★
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NANASS(金币+1): 谢谢哦！ 2011-12-05 14:33:25
……
消化后当然是成团了
要用枪吹打打开
lz真是新手啊……
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4楼2011-12-04 19:30:48
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julietguo

银虫 (正式写手)
★
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NANASS(金币+1): 谢谢 2011-12-05 14:22:17
我也刚开始养细胞，与楼主一起加油啊！我们这边是先用加EDTA的胰酶消化，等细胞间隙增大，细胞变圆的时候，用毛细多吹打几次，把细胞吹打下来。
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5楼2011-12-04 19:47:52
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yqq-nobel

银虫 (正式写手)
★
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NANASS(金币+1): 谢谢 2011-12-05 14:24:03
楼主淡定，养细胞最怕的就是操作污染了。消化的时候，如果时间把握不好，胰酶可以PBS稀释点，延长消化时间，我刚开始养细胞的时候就是因为消化过度，把细胞给搞残了，长了好几天才长好，
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6楼2011-12-04 20:27:36
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
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NANASS(金币+1): 谢谢 2011-12-05 14:24:14
胰酶浓度不能太大     不能用火烧沾过细胞的东西在加培养基   
细胞培养的原料药质量可靠   你的血清、培养基 是哪家的啊
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7楼2011-12-04 20:46:25
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cxl_yll

木虫 (正式写手)
★
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癌细胞还不好养啊，长得又快又好，给个环境就能生存。
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10楼2011-12-05 17:54:27
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bietaikeqiu

木虫 (职业作家)
★
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NANASS(金币+1): 2011-12-06 08:33:51
有点点可能是染菌了
都消化掉了可能是时间没把握好
以后操作多注意，养的时间长了、熟练了就好了。。。。
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11楼2011-12-05 19:24:22
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NANASS

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by cxl_yll at 2011-12-05 17:54:27:
癌细胞还不好养啊，长得又快又好，给个环境就能生存。

是有点难养，一阵一阵滴！
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12楼2011-12-06 08:29:34
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zhjichen

金虫 (著名写手)
★
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NANASS(金币+1): 2011-12-06 08:32:21
LZ要耐住性子啊，我也是养细胞的新手，前面的人说的对，养细胞首先要保证没有污染，其次才是保证长的状态好不好。慢慢来，多向周围的高手学习，多看别人操作。
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13楼2011-12-06 08:29:36
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NANASS

银虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by bietaikeqiu at 2011-12-05 19:24:22:
有点点可能是染菌了
都消化掉了可能是时间没把握好
以后操作多注意，养的时间长了、熟练了就好了。。。。

嗯嗯……谢谢！O(∩_∩)O~
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14楼2011-12-06 08:30:25
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NANASS

银虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by zhjichen at 2011-12-06 08:29:36:
LZ要耐住性子啊，我也是养细胞的新手，前面的人说的对，养细胞首先要保证没有污染，其次才是保证长的状态好不好。慢慢来，多向周围的高手学习，多看别人操作。

嗯嗯，呵呵……共同进步！
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15楼2011-12-06 08:31:41
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
AGS在几株胃癌细胞中是比较麻烦的，生长速度不快，而且要很有耐心才行
如果有点点，可以重新复苏一株，也有可能是细胞状态差，这个要勤换液
消化的时候用PBS稀释一下胰酶，减缓脱壁的时间，这个也是要自己摸索的
养细胞要有耐性，如果细胞密度不够，先不要传代，等细胞密度上去了再传代，状态会好很多的
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NANASS
16楼2011-12-06 09:04:04
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NANASS

银虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
16楼: Originally posted by sxxuan at 2011-12-06 09:04:04:
AGS在几株胃癌细胞中是比较麻烦的，生长速度不快，而且要很有耐心才行
如果有点点，可以重新复苏一株，也有可能是细胞状态差，这个要勤换液
消化的时候用PBS稀释一下胰酶，减缓脱壁的时间，这个也是要自己摸索的 ...

嗯嗯，谢谢您！不知您有没有养过A375、Hela、BGC这几株细胞呀，哪个好养些呀？还望您赐教！O(∩_∩)O~
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17楼2011-12-07 20:45:37
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sxxuan

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
17楼: Originally posted by NANASS at 2011-12-07 20:45:37:
嗯嗯，谢谢您！不知您有没有养过A375、Hela、BGC这几株细胞呀，哪个好养些呀？还望您赐教！O(∩_∩)O~

A375没养过。Hela和BGC都挺好养的。一开始就看细胞复苏的状态如何，这个不是自己能把握的因为和冻存有关，不过离心后细胞会长得好一点。只要复苏成功了，到后面基本就是疯长
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18楼2011-12-08 09:39:40
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NANASS

银虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by sxxuan at 2011-12-08 09:39:40:
A375没养过。Hela和BGC都挺好养的。一开始就看细胞复苏的状态如何，这个不是自己能把握的因为和冻存有关，不过离心后细胞会长得好一点。只要复苏成功了，到后面基本就是疯长

OK，谢谢！O(∩_∩)O~
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19楼2011-12-09 08:50:23
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peng5053

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
NANASS(金币+1): 2011-12-16 20:24:30
养细胞一定要心平气和，慢慢去摸索，体会，多和别人交流。时间久了就会好起来的。
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20楼2011-12-09 17:05:03
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labbench

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
消化时间缩短呗。比如室温30秒，就吸走。
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21楼2012-12-17 18:31:22
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feiwuqq8楼
2011-12-05 08:11   回复  
NANASS9楼
2011-12-05 08:26   回复  
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