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kuboy212419772

铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr 图片 求助!!!

最近PCR出现这种情况,图中出现的不是需要的目的片段(200bp),maker 右边是基因组,迷惑,求助!

717187_1363012539_271.jpg
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是引物特异性差,先做下退火温度梯度看看。
4楼2013-03-19 00:34:13
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查看全部 9 个回答

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
特别像是二聚体  你的引物设计的怎么样  是不是有dimer
2楼2013-03-18 22:38:56
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生命

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得最下面那个有点像dimer,是不是引物特异性有问题?你把引物在序列里找一下,看看能不能找着相似的……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
守恒!!!
3楼2013-03-19 00:13:12
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qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
的确出现了非特异性扩增,引物特异性差,需重新设计,
同意楼上先做整体的退火温度梯度试验搜寻一下。
毕业回望科研路,满目疮痍一身土
5楼2013-03-19 06:42:10
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