24小时热门版块排行榜    

查看: 1532  |  回复: 8

kuboy212419772

铜虫 (初入文坛)

[求助] pcr 图片 求助!!!

最近PCR出现这种情况,图中出现的不是需要的目的片段(200bp),maker 右边是基因组,迷惑,求助!

717187_1363012539_271.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
特别像是二聚体  你的引物设计的怎么样  是不是有dimer
2楼2013-03-18 22:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生命

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得最下面那个有点像dimer,是不是引物特异性有问题?你把引物在序列里找一下,看看能不能找着相似的……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
守恒!!!
3楼2013-03-19 00:13:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能是引物特异性差,先做下退火温度梯度看看。
4楼2013-03-19 00:34:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
的确出现了非特异性扩增,引物特异性差,需重新设计,
同意楼上先做整体的退火温度梯度试验搜寻一下。
毕业回望科研路,满目疮痍一身土
5楼2013-03-19 06:42:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下面的不太亮的才是dimer吧,上面较亮的应该是非特异性扩增,楼主应该检查引物特异性。虽然不知道楼主是何种marker,但一般marker最小的片段都较小,据此推断非特异性条带很可能小于100bp。
6楼2013-03-19 08:44:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

莹莹陀zws

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物特异性不好,把退火温度提高再试试,不行就重新设计引物或者换。
悲伤着你的悲伤,幸福着你的幸福
7楼2013-03-19 09:31:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kuboy212419772

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by joan198108 at 2013-03-19 08:44:16
下面的不太亮的才是dimer吧,上面较亮的应该是非特异性扩增,楼主应该检查引物特异性。虽然不知道楼主是何种marker,但一般marker最小的片段都较小,据此推断非特异性条带很可能小于100bp。

嗯,是小于100bp,marker:100,250,500的
8楼2013-03-19 09:52:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

119904386

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议跑个touchdown,还这样的话,换引物
9楼2013-03-20 15:56:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kuboy212419772 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:23 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 10/500 2026-11-06 12:32 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
请填处理意见