| 查看: 1429 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
jiangcheng14金虫 (小有名气)
|
[求助]
如何确定一段线性DNA的末端序列
|
||
| 一段已知序列的质粒，被一个蛋白切了一刀，成为线性，如何确定切出的线性DNA的末端序列。所切出的DNA末端是平端或粘性末端未知。 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有243人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何查找一个蛋白DNA结合域的基因序列？
已经有4人回复
- 一段序列（不是基因，是非编码RNA）怎么知道都有哪些miRNA可能作用于他呢？
已经有4人回复
- 如何克隆一段1200bp的真核基因，序列来自NCBI
已经有7人回复
- 知道cDNA序列，如何知道它的编码区和非编码区
已经有9人回复
- 以1800的线性DNA做模板PCR怎么P不出来
已经有9人回复
- 用什么方法去除一个基因中的一段序列
已经有11人回复
- 关于质粒的PCR
已经有5人回复
- 关于基因构建中开放阅读框架的若干问题
已经有7人回复
- 求助内切酶的问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】小弟对启动子序列的确定有惑，望解惑。
已经有17人回复
- 【求助/交流】怎样在一段序列中查找可能的测序引物？
已经有4人回复
- 【求助/交流】怎样从一段序列中查找基因结构
已经有12人回复
- 【求助/交流】请高人帮我详尽的分析一段DNA序列
已经有17人回复
mascotte
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1998.9
- 红花: 3
- 帖子: 328
- 在线: 193.4小时
- 虫号: 492008
- 注册: 2008-01-07
- 专业: 生物化学
5楼2013-03-01 10:45:46
mascotte
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1998.9
- 红花: 3
- 帖子: 328
- 在线: 193.4小时
- 虫号: 492008
- 注册: 2008-01-07
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+5, 说的很详细 2013-03-01 10:44:39
jiangcheng14: 金币+20 2013-03-02 16:30:55
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+5, 说的很详细 2013-03-01 10:44:39
jiangcheng14: 金币+20 2013-03-02 16:30:55
|
既然质粒序列已知，就可以选取能够酶切改质粒的已知内切酶，举例来说，如果质粒的大小是2000，可以选取A,B两个内切酶，，且A,B的位置离得稍远即可，例如200bp。未知蛋白用X表示。X的位置有三种可能，1，在A,B间；2，在AB外；3，在A和B上； 如果是第三种情况，用X切过以后，A（或B）将不能再切割该质粒，说明X的位置在A（或B）附近； 在第一种情况下，A,B双酶切后出现的一大一小两个片段，小的能被X切开，大的不能； 这两种情况下，在A的位置酶切位点附近设计测序引物，以A和X双切的小片段作为模板，做测序PCR，测序即可得到X切割后的末端序列。 第二种情况下X能切割AB双切后的大片段，此时可以先用A和X双切质粒，再用B切两个片段，确定X在B的近端或是远端，并通过切开的片段大小确定ABX三者在质粒上的大致位置。之后在X大致位置上游设计测序引物，以x切割后的质粒做模板测序即可。 |
2楼2013-02-28 19:02:20
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
3楼2013-03-01 01:17:10
jiangcheng14
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1569
- 散金: 60
- 帖子: 169
- 在线: 78.4小时
- 虫号: 1484428
- 注册: 2011-11-09
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2013-03-01 10:14:02
