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非变性凝胶电泳回收多糖
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xiaoliyaya
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[交流]
非变性凝胶电泳回收多糖
不知道有没有这样做过的,我看网上没有这一块的,我现在做了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,但是想回收纯化,有没有做过多糖切胶回收的啊,那样的话就得用非变性凝胶电泳了,不知道怎么操作
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虫号: 875515
★
xiaoliyaya(金币+1): 谢谢参与
非变性凝胶电泳是不加尿素的PAGE,直接用聚丙烯酰胺制胶就可以了。跑出来的条带不仅和所带电荷数有关,还与分子构型有关系。
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2楼
2013-02-27 16:09:47
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gaojuan1985
新虫
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虫号: 1374933
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多糖做电泳,听我老师说他上世纪八十年代读研究生的时候做过。SDS-PAGE肯定是不合适的,因为多糖怎么跟SDS结合?所以可能就得用native PAGE。这里就有一个问题,如果你的是中性多糖的话,是不带电荷的。不带电荷,怎么形成电场往下跑?根本就跑不下去嘛。如果是酸性或碱性多糖,或许可以一试。但是电泳的缓冲液系统就得去尝试了。另外,多糖都是复杂的混合物,或者说不会像蛋白一样,最后形成的是一条带。听我老师说,他那时候做,最后出来的是模糊的一片,呵呵。具体条件没听他说过,不清楚。
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3楼
2013-02-28 12:01:27
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