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970402570

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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红花: 2
帖子: 44
在线: 19.4小时
虫号: 2170734
注册: 2012-12-06
专业: 生物化学

[求助] 请问我应该选择哪个温度作为引物的退火温度？

下面的图片是我扩增图片，这四个是一组温度梯度，可是第二个没有条带，温度从左到右分别是48,50,52,54度，我应该用哪个温度？我已经做过很多次了，都是这个结果

捕获.PNG

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1楼 2013-02-21 19:39:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

无疆@行者

银虫 (小有名气)

应助: 60 (初中生)
金币: 241.8
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虫号: 1416887
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专业: 病毒学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
970402570: 金币+1, ★有帮助 2013-02-24 20:45:47

PCR不是很好，不知道你是多少个循环，我做PCR最低退火温度在55.看你的条带没有非特异性扩增，55就可以。

2楼2013-02-21 22:03:28

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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