| 查看: 3466 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
wangzhe163金虫 (小有名气)
|
[求助]
荧光定量PCR扩增效率低
|
|
|
哪位高人在做相对荧光定量PCR？我最近在做标准曲线的时候遇到麻烦了，还请高人指点迷津啊。 在绘制标准曲线的时候，标准品是重组质粒，按10倍倍比稀释，取六个稀释度做标准线，R方能在0.99以上，但是扩增效率一直徘徊在55%-75%之间。  ，看网上说的解决办法：增加引物浓度，降低退火温度，改用三步法，（质粒线性化，我连的T-simple，这个载体上面应该有一个ECORV的酶切位点，但是我就是切不开 ）。这些方法我都试过了，引物也重新设计了sweat:，用的试剂是宝生物的SYBR，仪器是ABI 7500.小弟已困惑多日，请高人指点，在此谢过！ |
回复此楼» 猜你喜欢
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有276人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
-
两个氟原子与一段氨基甲酸甲酯：BLU-5937 的母液配制与稳定性边界
已经有0人回复
-
司美那非（TPN171）：从嘧啶酮母核到工艺放大的结构、色谱与质控参数解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 着急！RT-PCR扩增效率低，情况很诡异，求助高手帮忙指点
已经有12人回复
- 有关PCR引物
已经有3人回复
- 荧光定量扩增效率低怎么办
已经有3人回复
- Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
已经有7人回复
- PCR试剂进行大批量配制分装，却出现了扩增效率低下的结果。
已经有11人回复
- 求助 土壤基因组 PCR 扩增问题
已经有30人回复
- 做RT-PCR的战友们，内标定量怎么做？
已经有18人回复
- 荧光定量怎么成了这样
已经有26人回复
- puf酶与普通Taq酶混用PCR问题
已经有22人回复
- PCR无任何条带，完全是空白胶
已经有15人回复
- 【求助/交流】实时荧光定量PCR的扩增效率低该如何改进？
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于降落pcr的问题！
已经有4人回复
- 原来引物设计真的不是件容易的事~
已经有22人回复
wangzhe163
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 997
- 散金: 468
- 红花: 1
- 帖子: 79
- 在线: 44小时
- 虫号: 1492171
- 注册: 2011-11-15
- 性别: GG
- 专业: 兽医免疫学
5楼2013-01-22 09:20:39
路过ing 2楼2013-01-21 10:44:50
yesali
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2168.6
- 沙发: 1
- 帖子: 643
- 在线: 127.4小时
- 虫号: 2233223
- 注册: 2013-01-10
- 专业: 植物遗传学
3楼2013-01-21 10:55:52
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
4楼2013-01-21 11:19:09
