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zg1415

金虫 (正式写手)

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[求助] TA克隆问题求助~~

最近TA克隆两个片段，大小分别为2kb和3.2kb,分别为下图左边6个和右边6个，中间和最后分别是λ/Hind 3和Marker 3，求分析转化子提质粒的电泳图，转进去了吗？个人感觉电泳图很奇怪~ 谢谢！

2013.1.18.JPG

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一直被模仿，从未被超越

1楼 2013-01-19 17:45:27

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

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用的什么T-载体？因为质粒超螺旋构象跑得比同分子量的marker快，最好做个单酶切确定质粒大小。

3楼2013-01-19 18:28:54

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zg1415

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-19 18:28:54
用的什么T-载体？因为质粒超螺旋构象跑得比同分子量的marker快，最好做个单酶切确定质粒大小。

pMD18T simple 用的东西应该都没问题，以前从未遇到过，都是一次成功~

一直被模仿，从未被超越

4楼2013-01-19 21:05:00

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oldflying

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

没用空白质粒比较下？加一个空白质粒作对照就知道了，看左边和右边条带位置差不多，可能有问题啊。

一个人的努力和坚持！

5楼2013-01-19 21:12:19

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gastrodia

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【答案】应助回帖

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有没有连接成功，你可以转化了之后使用M13引物筛克隆呀

6楼2013-01-19 21:37:40

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