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淡竹2066

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶活测定问题请教

最近在做一个原核表达蛋白的酶活测定,具体是将镍柱纯化获得的蛋白通过与NADH偶联来检测其活性,为了确保实验的准确性,每次纯化的蛋白样品都做3个平行,结果没什么问题。但是不同批次纯化到的蛋白测定的酶活结果却不能很好的平行,这是为什么呢?纯化过程和酶活测定方法都是按照相同的步骤来做的。不知道有没有虫友也遇到过类似的问题。。。。求助!!!!急!!
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千年一雨

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不同批次的酶,如果酶活误差在20%以内是可以接受的。另外,如果酶放的时间不同,可能稳定性会受到影响,导致酶活不同。
10楼2013-05-07 20:59:00
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