24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1359  |  回复: 8

menghabai

新虫 (初入文坛)

[求助] 第一次pcr成功,同样的条件再P不出来了,求救???

各位大仙,我第一次pcr有条带了,想做克隆,于是把体系加倍成50微升,结果没有条带,我又把体系恢复成了原来的体系25微升,结果还是没有,没办法,我就把第一次pcr的产物进行稀释10  50  100  500  1000倍,再进行pcr,还是没有,请问,我该怎么办呢???
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先确定酶没有问题。有时候酶用着用着就不行了。试试换一管酶。此外,你P出结果的那次PCR的效率怎么样?如果产物浓度比较高25μl做克隆也没问题的。如果P出的条带不是很亮,应该是你还没有找到PCR的最适条件。你的原始模板是基因组DNA吗?
2楼2013-01-18 09:45:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyunokok

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换体系的时候,你的模板都是一样的吗?这种情况我有时也会遇到,模板有没有降解的情况呢?可以再跑一次电泳验证一下。。。
3楼2013-01-18 10:13:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
4楼2017-08-17 15:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
5楼2017-08-17 21:40:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
6楼2017-08-18 11:35:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
7楼2017-08-18 12:47:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

前行的璐

新虫 (小有名气)

换个引物试试
8楼2017-08-18 14:59:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
9楼2017-08-18 21:28:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 menghabai 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 313求调剂 +4 卖个关子吧 2026-03-31 4/200 2026-03-31 10:25 by 不吃魚的貓
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +7 手机用户 2026-03-26 7/350 2026-03-31 10:13 by cal0306
[考研] 282求调剂 +3 呼吸都是减肥 2026-03-31 3/150 2026-03-31 10:00 by wangjy2002
[考研] 本2一志愿C9-333分,材料科学与工程,求调剂 +5 升升不降 2026-03-31 5/250 2026-03-31 09:18 by 535743368
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 一志愿华中师范化学332分求调剂 +3 Lyy930824@ 2026-03-29 3/150 2026-03-30 20:15 by DHUSHUAI
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +9 XX小邓 2026-03-29 9/450 2026-03-30 17:18 by limeifeng
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研经历 +8 cccchenso 2026-03-29 8/400 2026-03-29 23:53 by 我是小康
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-29 5/250 2026-03-29 16:46 by 学员8dgXkO
[考博] 26申博 +3 加油冲啊! 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 085600,材料与化工321分调剂 +4 大馋小子 2026-03-27 6/300 2026-03-27 14:11 by 松花缸1201
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 考研调剂 +10 呼呼?~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
信息提示
请填处理意见