24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

应助: 42 (小学生)
金币: 43.2
帖子: 316
在线: 49.1小时
虫号: 1346820

[交流] ?恼婧吮磉_到原核表達蛋白載體構建的問題？

我有幾個膜蛋白都是昆蟲細胞表達的，感覺效果一般，想換原核試試，不知道換的話有什么要注意的？密碼子應該一樣吧，載體怎麼換呢？用什麽載體合適，要注意哪些條件呢

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2013-01-11 08:56:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001

★
loveskyzhou(金币+1): 谢谢参与

膜蛋白的表达本身就不是很容易，很容易形成包涵体，复性时往往有一定难度。如果你希望直接表达成活性形式，表达量可能不是很高。不知道你的蛋白是否有修饰，原核体系主要是缺乏一些蛋白修饰的功能。此外，你需要检查表达基因的使用偏好，如果有宿主稀有密码子的话，表达量会很难上去的。载体也有很多，如果想在大肠杆菌里表达，一般常用的是lac/tac启动子诱导表达，有带不同标签的，可以便于纯化和增加膜蛋白的可溶性。