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蛋白之家

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
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专业: 病原细菌与放线菌生物学

[求助] 原核表达和SDS-PAGE

我做的4个基因的克隆然后转到pET-28a上了，然后进行了一系列的检测，都合适了，最后跑SDS-PAGE，具体操作如下：
将检测合适的转到BL21(DE3)里的保存的菌液摇菌 37度过夜；
第二天，1:50的比例转摇；
OD600=0.6-0.8时停止转摇（时间是下午2点），
然后置于4度，待晚上7点加IPTG诱导，28度，过夜（体积为20ml）
次日，将诱导好的，没有诱导的，离心，收集上清，并将沉淀加灭过菌的水稀释至总体积为20ml,然后超声波处理
然后跑SDS-PAGE，
浓缩胶为4% 分离胶为12%
结果什么都没有
不知道为什么
文献上看别人都是这样做的啊为什么我的就是不行呢？
麻烦大家帮忙分析一下！
谢谢！

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