24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2602  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hjhjhj6

金虫 (小有名气)

[求助] RNA降解,求高人分析一下原因。

新手,提的斑马鱼肝脏和卵巢的RNA,takara的trizol,操作应该问题不大,枪头都是无RNA酶的。取样是新鲜样,20mg左右,1mltrizol,液氮和匀浆器法都试过,电泳图都差不多,5s条带特别亮。电泳液是TAE,DEPC水配置,找了很多原因,该注意的感觉都注意到了,DEPC处理什么的,但依然降解。氯仿、异丙醇没预冷,乙醇是-4度保存的,这个有影响吗?跟着别人的一起做也降解,别人的还好,是不是组织快还需要再小一点?
希望大家交流一下经验,一开始也提不好,后来把问题解决了的朋友说说问题出在哪里,供我参考。谢谢!
IM001245.Tif(2.66MB)
http://kuai.xunlei.com/d/LnU4DTfp.pPqUAQA570?p=130497
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

HakunaMatata~
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjhjhj6

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 追梦的人1987 at 2013-01-14 21:03:46
这有可能是跑胶的过程中降解了,有可能是点样的过程中混进RNA酶了,总之,跑胶的环节也要尽量的注意

点样过程中混入RNA酶的可能性大不?  是不是Loading Buffer不太好?
还是胶的问题?
HakunaMatata~
9楼2013-01-15 09:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

616057157

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hjhjhj6: 金币+3, 有帮助 2013-01-14 20:43:44
hjhjhj6: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-01-15 17:44:09
亲,你在提取过程中要4度离心,且操作越快越好。你也要注意细胞数目和Trizol试剂的比列,裂解彻底,提取的RNA条带才好。
不曾拥有何谈失去,不必伤心!!!
2楼2013-01-08 08:25:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hjhjhj6

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 616057157 at 2013-01-08 08:25:22
亲,你在提取过程中要4度离心,且操作越快越好。你也要注意细胞数目和Trizol试剂的比列,裂解彻底,提取的RNA条带才好。

谢谢  但这些都注意了啊。。。组织相对来说已经很小很小了  会不会是DEPC水的问题?  我水都是自己配置的  不是买的现成的
HakunaMatata~
3楼2013-01-08 11:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言默haha

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hjhjhj6: 金币+5, ★★★很有帮助, 嗯,我换了下水,感觉好一些 2013-01-14 20:36:56
hjhjhj6: 金币+5 2013-01-15 17:44:21
你应该检查一下使用水的质量 可能水已经污染了
4楼2013-01-11 10:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 334求调剂 +7 Trying] 2026-03-31 7/350 2026-03-31 12:33 by 无际的草原
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +5 Acaciad 2026-03-25 5/250 2026-03-31 12:04 by 北风之神.
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-31 4/200 2026-03-31 11:56 by jp9609
[考研] 南京大学化学调剂 +11 景随风 2026-03-29 16/800 2026-03-31 10:14 by herarysara
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-30 10/500 2026-03-31 07:43 by yishunmin
[考研] 085602化工求调剂(331分) +8 111@127 2026-03-30 8/400 2026-03-30 21:23 by 研究僧导导
[考研] 277跪求调剂 +8 1915668 2026-03-27 12/600 2026-03-30 21:01 by dophin1985
[考研] 286分调剂 +10 Faune 2026-03-30 11/550 2026-03-30 20:35 by 啊李999
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +11 nnnnnnn5 2026-03-25 11/550 2026-03-29 20:42 by 无际的草原
[考研] 总分293求调剂 +8 加一一九 2026-03-25 11/550 2026-03-29 19:53 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 305求调剂 +8 RuiFairyrui 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:22 by fmesaito
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿吉大071010,316分求调剂 +3 xgbiknn 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:36 by guoweigw
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
信息提示
请填处理意见