应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助苯酚氯仿发提取DNA
51/1返回列表
查看: 2549  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

fbcf7f7

木虫 (著名写手)

[求助] 求助苯酚氯仿发提取DNA

样品为粪便和菌液，准备做DGGE用，但是上次用这个方法同批次的差异很大，有的条带很亮，有的很暗，还有的没有，想请大家帮忙看一下，在70%乙醇洗涤时应该注意什么？个人认为这一步可能DNA损失很大
谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-06 22:18:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fbcf7f7

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-07 14:42:38
DNA提完后可以定浓度，也可以跑胶看。但如果样品RNA消化不完全的话，会干扰浓度测定。...

再麻烦问一句，如果直接进行菌液PCR效果会怎么样？
赞一下 回复此楼
8楼2013-01-07 21:25:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fbcf7f7: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-01-07 09:16:34
fbcf7f7: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-07 09:18:20
70%的乙醇是洗去多余的盐，应该没什么损失吧。这一步一般就是用手指轻轻把沉淀弹起来，然后就去离心了。你所说的差异大能否上个图看看？
赞一下 回复此楼
2楼2013-01-07 03:03:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fbcf7f7

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-07 03:03:00
70%的乙醇是洗去多余的盐，应该没什么损失吧。这一步一般就是用手指轻轻把沉淀弹起来，然后就去离心了。你所说的差异大能否上个图看看？

图没有拍下来，就是同批次提取的样品PCR后有的条带很亮，有的条带暗，还有的几乎看不到
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-07 09:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fbcf7f7 at 2013-01-07 09:18:01
图没有拍下来，就是同批次提取的样品PCR后有的条带很亮，有的条带暗，还有的几乎看不到...

PCR的结果不能直接说明总DNA的量。提DNA的损失主要是在裂解完成度和酚氯仿抽提，应该和乙醇洗没太直接关系。PCR时模板浓度需要在一个范围才能有效地扩增，如果模板太多有时候反而P不出来。
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-07 11:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jCd0dEvKHShX 2026-08-29 4/200 2026-08-30 03:26 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:29 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:52 by ZPa0EcMwuECS
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-29 09:26 by G6APbkg8SA6w
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭