| 查看: 11434 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
shizishanshang至尊木虫 (职业作家)
|
[求助]
请问His-tag（组氨酸标签）怎么加到我的蛋白上去？ 已有1人参与
|
|
|
大家好，我实验过程中需要做几个抗体（这些是一抗），向老外咨询制作过程，回信说 The best is to subclone the hydrophilic loop of A proteins or cytoplasmic region of B proteins, express in the E. coli with His-tag, purify the protein and send it for immunization in Rabbit or Rat or Mouse. 因为我做的是两大类蛋白，姑且以A和B代替。 我看老外的意思是要我分别克隆一段特殊的序列（这个序列我知道，就是我的蛋白的其中一段），然后加上 His-tag（组氨酸标签）在E. coli 中表达，然后再提取纯化蛋白后在兔子或老鼠中获得抗体？ 这中间有个问题，怎么加上 His-tag（组氨酸标签）？是直接设计引物引进 His-tag（组氨酸标签），还是按照有些人说的转到PET-30a这样还有 His-tag（组氨酸标签）的载体上获得？ 请问有没有同学做过加 His-tag（组氨酸标签）的实验啊，请指教啊！ [ Last edited by silicare on 2014-3-28 at 14:03 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
304求调剂
已经有6人回复
-
材料工程专硕调剂
已经有6人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有4人回复
-
085700资源与环境308求调剂
已经有3人回复
-
求材料调剂
已经有8人回复
-
294求调剂材料与化工专硕
已经有5人回复
-
一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂
已经有4人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有6人回复
-
085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以）
已经有3人回复
-
330求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 加我一个又怎样
已经有10人回复
- 组氨酸结合镍柱问题
已经有16人回复
- 如何去除C端标签
已经有5人回复
- His tag结合问题
已经有4人回复
- His tag真核细胞蛋白纯化
已经有11人回复
- 请教pcDNA3.1上酶切位点的问题
已经有6人回复
- 急！500kD 蛋白western 求助
已经有17人回复
- 10%NaOH是怎么加的
已经有13人回复
- 请问His-tag（组氨酸标签）怎么加到酶蛋白上？
已经有20人回复
- 蛋白前面有一个his-tag和sumo-tag,想去掉sumo-tag，只留下一个his-tag，该怎么做
已经有5人回复
- His tag antibody如何选择？
已经有6人回复
- GST 和 His Tag的选择
已经有7人回复
- 带HIS-tag标签蛋白过NI-NDA挂不上柱子
已经有5人回复
- HIS标签的蛋白不挂柱，求助
已经有6人回复
- 关于pET32a的HIS标签
已经有10人回复
- 求his标签蛋白纯化步骤
已经有3人回复
- EST标签的这个“标签”指的是什么？
已经有4人回复
- His Tag融合蛋白纯化
已经有8人回复
- 关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况
已经有17人回复
- 为什么用胰蛋白酶消化细胞？
已经有6人回复
- 怎样在表达载体质粒接上His tag标签
已经有8人回复
- 【求助/交流】组氨酸标记的蛋白表达活性问题
已经有17人回复
- 【求助/交流】酵母表达外源蛋白，His-tag降解怎么办
已经有5人回复
alarace
至尊木虫 (知名作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 82 (初中生)
- 金币: 20034.9
- 散金: 15172
- 红花: 20
- 帖子: 9156
- 在线: 2796.3小时
- 虫号: 1546961
- 注册: 2011-12-22
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2012-12-10 08:35:35
2楼2012-12-08 21:21:01
静安jingan
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 86 (初中生)
- 贵宾: 0.932
- 金币: 9295.7
- 散金: 2894
- 红花: 43
- 沙发: 28
- 帖子: 4233
- 在线: 1412.1小时
- 虫号: 2005883
- 注册: 2012-09-16
- 性别: MM
- 专业: 免疫相关疾病其他科学问题
3楼2012-12-09 11:15:12
shizishanshang
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 10570.4
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 3882
- 在线: 1215.1小时
- 虫号: 297159
- 注册: 2006-11-18
- 性别: GG
- 专业: 植物学
4楼2012-12-09 22:21:32
