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pyxawp

铁虫 (初入文坛)

[求助] 液相走一个样品,2种方法差别很大

主峰为碱性化合物,方法一:甲醇+缓冲液;方法二:乙腈+缓冲液。缓冲液为PH8.0磷酸盐。
目前的情况是甲醇方法出两个峰,乙腈方法一个峰,峰型都很好,甲醇的两个峰最大吸收也不一致,2种方法的梯度都是我们平时比较通用的梯度。请问这种情况可以确定2个峰是2种物质吗?有没有可能是PH选择错误导致的峰分裂?
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以是确定两种物质或两种以上的物质,不知道用乙腈为什么只有1个峰,包在一起了?不知道峰形如何,可以用DAD看一下乙腈走的峰,
4楼2012-12-05 10:38:07
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cdccd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pyxawp: 金币+10, 用PH6.0缓冲液走甲醇方法,还是很好看的2个峰,应该是2个物质 2012-12-05 16:26:41
1、不知道你乙腈的浓度是多大,但是一般情况下,加了乙腈以后溶液的pH会发生较大的改变(常常是酸的更酸、碱的更碱),你测一下看看溶液实际pH看看是不是自己要的。
2、什么叫峰分裂?你俩峰都基线分离了!我感觉就是2个化合物。
3、不怕累的话,进样量大点,把两个峰接下来,重新进样,看是不是每个接下来的峰还会分裂。如果A,每个峰重进样都分成现在这两个保留,那就是你所谓的峰分裂;B,各有独立的保留时间,那就非常肯定是两个化合物了。
4、我不知道还有传说中的“通用梯度”存在。建议再多试试几个梯度看看。
忠厚啊!你正是无能的别名!
6楼2012-12-05 10:43:05
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普通回帖

jessonkarry

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
两个峰离多远,如果远的话就不用考虑了,如果有DAD的话看一下纯度就知道了
2楼2012-12-05 10:11:25
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pyxawp

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jessonkarry at 2012-12-05 10:11:25
两个峰离多远,如果远的话就不用考虑了,如果有DAD的话看一下纯度就知道了

纯度指的是峰纯度吗?Peak purity?

1.jpg

3楼2012-12-05 10:30:27
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有一个可能是你的样品是碱性的,甲醇显弱酸性,甲醇比例大的话可能流动相偏向酸性了,使你的目标物分解了,这就解释为什么甲醇显示的是两个峰,
5楼2012-12-05 10:41:42
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pyxawp

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lhp123789 at 2012-12-05 10:38:07
可以是确定两种物质或两种以上的物质,不知道用乙腈为什么只有1个峰,包在一起了?不知道峰形如何,可以用DAD看一下乙腈走的峰,

乙腈的DAD

2.jpg

7楼2012-12-05 10:50:57
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liudongxiang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、可能是两种物质,
2、一种物质的异构体,在乙腈体系未分开,到甲醇体系就完全分开
3、如果有DAD检测器,看一下波长吸收图是否一样。
4、建议沟通下,看一下合成化合物是否会有异构体产生,或是生成了极性比较相近的化合物。
8楼2012-12-05 10:56:19
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by pyxawp at 2012-12-05 10:50:57
乙腈的DAD

2.jpg
...

感觉纯度还行,但是不会是两个峰包在一起,两个那么大的峰包在一起纯度肯定在0.6左右了,从峰形也能看出来,测测你样品的PH吧,用甲醇的PH估计偏酸,使你的目标物分解了。
9楼2012-12-05 10:59:18
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liu761227

新虫 (小有名气)

你还得考虑一下,你的目标物跟醇会发生反应吗?会不会是和甲醇反应了有一个产物?这么大的峰,就是用乙腈应该也能看到啊,走梯度 完一重合有点不靠谱,所以呢是不是在甲醇和乙腈的差别上呢?
上面有一家说是有可能是异构体也是非常有可能的。
10楼2012-12-05 20:43:56
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