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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA提取离心问题。
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人

[求助] RNA提取离心问题。

RNA提取离心，说明书上说12000*g，10min,但我我提的量比较多，用10ml的离心管，这样只能用台式离心机，最大速度只能达到4000rpm，
想问一下，提RNA时如果离心时间过长有没有影响?
另外，如果选4000rpm，应该离心多少时间？
还有，12000*g,其中g为离心加速度，然后它和rpm有什么关系?
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1楼 2012-12-04 19:17:35
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wangqi20092

新虫 (小有名气)

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★
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1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-12-07 07:27:03
离心转速达不到要求，时间再长也没用。g比rpm大，用13000rpm就行了。网上有换算公式的。提RNA为啥要用50ml离心管啊？用的多就用用2ml的多做几管。
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2楼2012-12-04 20:30:12
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
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1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-12-07 07:27:10
rpm和g值的关系根据不同离心机转子有不同的换算关系。你可以查一下你用的转子，不过我认为4000rpm的是常速离心机，12000g算是高速的，沉淀核酸一般用这个速度。估计你的离心机达不到这个要求。有高速离心机转子可以上40ml的离心管。2L的建议不错，分装在小管里离心吧。
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3楼2012-12-05 08:09:12
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stewart3261

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-12-07 07:27:21
同意楼上，速度达不到，时间是不能弥补的！还是想办法换成低温高速离心机吧！g与rpm之间的关系是一定的，就是说一定的rpm对应一定的g。在某些超低温高速离心机上这个可以看到的！祝实验顺利！
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4楼2012-12-05 10:27:42
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
引用回帖:
4楼: Originally posted by stewart3261 at 2012-12-05 10:27:42
同意楼上，速度达不到，时间是不能弥补的！还是想办法换成低温高速离心机吧！g与rpm之间的关系是一定的，就是说一定的rpm对应一定的g。在某些超低温高速离心机上这个可以看到的！祝实验顺利！

我看说明书上说可以用2600*g,然后30-60分钟。你们别瞎说。
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5楼2012-12-05 12:45:25
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
离心时间过长，会提RNA有没有影响 ？
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6楼2012-12-05 12:49:38
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q317476148

铁杆木虫 (著名写手)

喵星人
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangqi20092 at 2012-12-04 20:30:12
离心转速达不到要求，时间再长也没用。g比rpm大，用13000rpm就行了。网上有换算公式的。提RNA为啥要用50ml离心管啊？用的多就用用2ml的多做几管。

为什么我看说明书上说可以用2600*g,然后30-60min
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7楼2012-12-05 12:50:41
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倾听世界0721

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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最好还是用小管做，多做几管，采用能达到转速的离心机。
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8楼2012-12-05 16:29:22
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xiayongxiu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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1949stone: 金币+1, 经验很重要 2012-12-07 07:27:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by q317476148 at 2012-12-05 12:45:25
我看说明书上说可以用2600*g,然后30-60分钟。你们别瞎说。...

尽信书不如无书，说明书也推荐的不一定就符合你的材料要求啊，我们实验室用同一种方法提不同材料的RNA，转速都不一样呢，具体多大转速你可以自己试试呗，不行就提高转速，宁愿速度高点也不要拖的时间太久，越久RNA就越容易降解。
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一切都要靠自己努力
9楼2012-12-05 21:39:11
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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1949stone: 金币+1, 同意 2012-12-07 07:28:02
肯定不行的，靠转速把RNA和其他杂质分开的，如果转速达不到的话，肯定不行
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10楼2012-12-06 08:39:31
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