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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] RNA提取 已有16人参与

昨天跟着师姐第一次提RNA  大家帮我分析下提的怎样吧 似乎有很多杂带
电泳图如下
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RNA提取问题

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1楼 2011-09-04 10:48:29
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zhen_fang

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
最后那最亮的一团啥东西？难道RNA裂解了，里面还有dna?
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2楼2011-09-04 16:50:09
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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhen_fang at 2011-09-04 16:50:09:
最后那最亮的一团啥东西？难道RNA裂解了，里面还有dna?

师姐说是染料，我们使用的是gelred
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3楼2011-09-04 18:30:08
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gagalady

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流。 2011-09-04 20:39:07
胶孔的地方 应该是 蛋白污染
紧接着 是 DNA污染
最亮的是RNA
最下面 模模糊糊的应该是试剂中是不是有你们说的染料
杂带 真的挺多的 很奇怪
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-09-04 18:59:21
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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gagalady at 2011-09-04 18:59:21:
胶孔的地方 应该是 蛋白污染
紧接着 是 DNA污染
最亮的是RNA
最下面 模模糊糊的应该是试剂中是不是有你们说的染料
杂带 真的挺多的 很奇怪

总的来说就是很失败吧
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5楼2011-09-05 07:59:50
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yidaqunyan

木虫 (正式写手)

博士
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利！ 2011-09-05 14:25:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by gloryping at 2011-09-05 07:59:50:
总的来说就是很失败吧

不算失败，看你们用的什么方法提取的，是用试剂盒还是自己配置的试剂，再想办法除蛋白和DNA污染
下一步看你打算做什么，我感觉得率挺高，只不过纯度差点
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不孝有三，读博为大！
6楼2011-09-05 08:56:09
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
adslye(金币+1): 感谢交流，祝顺利！ 2011-09-05 14:26:01
我觉得还是不错的
虽然有一点蛋白和DNA的污染，有时候组织里提出多条带（5，6条，甚至更多）来也是正常的
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-09-05 09:23:01
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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)
adslye: RNA质量没问题，做定量前要除DNA。 2011-09-05 14:26:35
引用回帖:
6楼: Originally posted by yidaqunyan at 2011-09-05 08:56:09:
不算失败，看你们用的什么方法提取的，是用试剂盒还是自己配置的试剂，再想办法除蛋白和DNA污染
下一步看你打算做什么，我感觉得率挺高，只不过纯度差点

我是用trizol提取的，下一步打算先逆转成cDNA，然后做定量PCR，不知道会不会有影响。
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8楼2011-09-05 09:27:54
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gloryping

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dfl204 at 2011-09-05 09:23:01:
我觉得还是不错的
虽然有一点蛋白和DNA的污染，有时候组织里提出多条带（5，6条，甚至更多）来也是正常的

我是从正常的肝细胞和肝癌细胞中提的RNA，不知道算不算正常。刚做这方面的东西，很多都不太懂，心里很慌。
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9楼2011-09-05 09:29:30
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by gloryping at 2011-09-05 09:29:30:
我是从正常的肝细胞和肝癌细胞中提的RNA，不知道算不算正常。刚做这方面的东西，很多都不太懂，心里很慌。

我是做植物的
动物和人的不是很了解
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gloryping
10楼2011-09-05 09:31:22
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