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torukmacto

铁虫 (著名写手)

[求助] 微卫星多重PCR

小弟要做微卫星多重PCR并进行STR分型有些问题请教大家，请做过这方面的朋友指点迷津，不胜感激！
多重PCR是用MIX还是单独加buffer,Taq酶，dNTPS?
用荧光标记引物，国内可以做几种荧光？
引物的扩增片段方面是否要有差别？
一般的反应体系是多少？
请大家积极发言，多多指教，多谢！多谢了啊！
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1楼 2012-12-02 21:08:17
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successgao

银虫 (小有名气)
有哪位高手帮我看看该怎么读峰图，谢谢
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重新开始学生生活
3楼2014-02-28 21:13:29
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秋雨心寒

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-03 16:29:15
ABI有一套STR的试剂，全套400个位点，基本可以将所有染色体覆盖。该套试剂有自己的promix，直接往里面加就OK了，很简单，但一套试剂比较贵，并且订购周期比较长。如果引物自己设计自己订，基本上是自己加buffer，taq，dNTP的。如果有ABI的那套promix也可以直接用，效果还可以。我目前用的自己设计引物荧光可以加三种，blue、green和yellow。一般三种颜色够用了。扩增片段根据你引物设计的距离来定的，我们这边一般不超过400bp。我们一直用的PCR体系是15微升。希望可以给你帮助。
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2楼2012-12-03 08:53:40
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