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torukmacto铁虫 (著名写手)
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[求助]
微卫星多重PCR
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小弟要做微卫星多重PCR并进行STR分型有些问题请教大家，请做过这方面的朋友指点迷津，不胜感激！ 多重PCR是用MIX还是单独加buffer,Taq酶，dNTPS? 用荧光标记引物，国内可以做几种荧光？ 引物的扩增片段方面是否要有差别？ 一般的反应体系是多少？ 请大家积极发言，多多指教，多谢！多谢了啊！  |
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-03 16:29:15
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| ABI有一套STR的试剂，全套400个位点，基本可以将所有染色体覆盖。该套试剂有自己的promix，直接往里面加就OK了，很简单，但一套试剂比较贵，并且订购周期比较长。如果引物自己设计自己订，基本上是自己加buffer，taq，dNTP的。如果有ABI的那套promix也可以直接用，效果还可以。我目前用的自己设计引物荧光可以加三种，blue、green和yellow。一般三种颜色够用了。扩增片段根据你引物设计的距离来定的，我们这边一般不超过400bp。我们一直用的PCR体系是15微升。希望可以给你帮助。 |
2楼2012-12-03 08:53:40
successgao
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