应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR100多次无法解决的难题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 1279  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bin120

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR100多次无法解决的难题

各位PCR高手,小弟遇到一个难题,我做普能PCR做了100多次,还是没有P出来,情况大概是这样的,同一逆转录条件,同一引物,同一mix,同一PCR反应条件,就是提取RNA(提取的RNA质量相当好)的细胞不同,结果是别人P的是一条带,我P的是多条带,我还换了4对引物,换了三种mix,结果都是这样,哎,郁闷!我也问了好多博士,硕士,分子生物学的老师,留学归来的大牛都没能给我解决!丁香园上是否有高手出来指点一下,小弟不胜感激.
这里有图(http://www.dxy.cn/bbs/topic/23800647)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
多个朋友,多一份成功的机会
1楼 2012-09-07 01:37:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiaoxianying

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是模板浓度高了，适当降低一下浓度试试
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-07 06:32:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hellokkzhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的图打不开
你有没有PCR的时候带一个别人的样品？结果如何？
有没有让同学帮忙做过你的样本？有没有重提过RNA？
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-07 09:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunjp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
相同的条件，不一样的结果，就要从不一样的地方进行分析。提取的RNA浓度是否一样，不同细胞表达的基因是否存在差异，祝你早日找到问题所在。
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-07 09:16:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以在你p出来的多条带里找出符合你那段基因大小的带回收，然后测一下序，在设计一个特异性引物，祝顺利
赞一下 回复此楼
每天坚持一点点，终会成功！相信自己
5楼2012-09-07 09:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bin120

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellokkzhu at 2012-09-07 09:06:27
你的图打不开
你有没有PCR的时候带一个别人的样品？结果如何？
有没有让同学帮忙做过你的样本？有没有重提过RNA？

重复不下20次
回复此楼
多个朋友,多一份成功的机会
6楼2012-09-07 09:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bin120

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qiaoxianying at 2012-09-07 06:32:57
有可能是模板浓度高了，适当降低一下浓度试试

你是说降低CDNA人量吗？？
赞一下 回复此楼
多个朋友,多一份成功的机会
7楼2012-09-07 09:54:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bin120

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sunjp at 2012-09-07 09:16:30
相同的条件，不一样的结果，就要从不一样的地方进行分析。提取的RNA浓度是否一样，不同细胞表达的基因是否存在差异，祝你早日找到问题所在。

我是测了RNA浓度的，然后均衡后在逆转录，也有人说是细胞的问题，但是换了细胞后，还是这样，不过都是膀胱癌细胞
赞一下 回复此楼
多个朋友,多一份成功的机会
8楼2012-09-07 09:56:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bin120

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by andyzhengwp at 2012-09-07 09:22:28
你可以在你p出来的多条带里找出符合你那段基因大小的带回收，然后测一下序，在设计一个特异性引物，祝顺利

呵呵，国外的那个大牛也是这样说
赞一下 回复此楼
多个朋友,多一份成功的机会
9楼2012-09-07 09:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的引物是怎么来的，要不要你让别人做一次你的实验看看
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
10楼2012-09-07 10:12:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bin120 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 11/550 2026-04-04 23:37 by 永字号
[考研] 可跨专业调剂 +3 周的得地 2026-04-04 6/300 2026-04-04 22:21 by barlinike
[考研] 材料专硕 调剂 +13 CXN123456 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:59 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +10 懒羊羊轻置玉臀 2026-04-02 11/550 2026-04-04 21:56 by laoshidan
[考研] 求调剂：085600材料与化工，考材科基，总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖！ 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 265求调剂 +17 林深温澜 2026-04-01 20/1000 2026-04-04 01:09 by userper
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 一志愿同济大学323分（080500）求调剂 +6 yikeniu 2026-04-01 6/300 2026-04-02 14:19 by smileboy2006
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 372求调剂 +3 jj涌77 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:57 by olim
[考研] 291求调剂 +20 Y-cap 2026-03-29 25/1250 2026-04-01 23:49 by 欣喜777
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 求调剂 生物学 377分 +6 zzll03 2026-03-31 6/300 2026-03-31 17:33 by 唐沐儿
[考研] 求调剂 +8 11ggg 2026-03-30 8/400 2026-03-31 13:56 by nanaliuyun
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭